[发明专利]稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒及其制备使用方法在审
申请号: | 201710916625.6 | 申请日: | 2017-09-30 |
公开(公告)号: | CN107703300A | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | 吴泽东;朱卫中;张金东;吴铮;朱雨;周珍珍 | 申请(专利权)人: | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573;G01N33/531 |
代理公司: | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙)34124 | 代理人: | 王志兴 |
地址: | 236000 安徽省合肥市包河经济开发区繁*** | 国省代码: | 安徽;34 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 稳定 天冬氨酸 氨基转移酶 检测 试剂盒 及其 制备 使用方法 | ||
1.一种稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分,包括的成分及相应含量为:
试剂R1:
试剂R2:
2.根据权利要求1所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1的pH为8.0。
3.根据权利要求1所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R2的pH为7.8。
4.一种制备如权利要求1-3任一项所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)配制试剂R1
a.按照试剂R1的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷溶于纯化水中,搅拌均匀,待充分溶解,配制成R1缓冲液;
b.按照试剂R1的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、乙二胺四乙酸二钠盐、迭氮钠、天冬氨酸溶于R1缓冲液中,搅拌均匀,待所有原料充分溶解,调节pH;
c.按照试剂R1的组分含量,将NADH、G6PD溶于上述步骤所得的混合溶液中,搅拌均匀,即制得试剂R1;
(2)配制试剂R2
a.按照试剂R2的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷溶于纯化水中,搅拌均匀,待充分溶解,配制成R2缓冲液;
b.按照试剂R2的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、α-酮戊二酸溶于R2缓冲液中,搅拌均匀,待所有原料充分溶解,调节pH;
c.按照试剂R2的组分含量,将苹果酸脱氢酶溶于上述步骤所得的混合溶液中,搅拌均匀,即制得试剂R2。
5.一种使用如权利要求1-3任一项所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将待测样品与试剂R1混合均匀,37℃孵育1min;
(2)用全自动生化分析仪测定步骤(1)反应后的吸光度A1,
(3)再与试剂R2混合均匀,37℃孵育2min;
(4)用全自动生化分析仪测定步骤(3)反应后的吸光度A2;
(5)根据A1和A2的吸光度变化值计算出样本中的天冬氨酸氨基转移酶的浓度。
6.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(1)中试剂R1和步骤(3)中试剂R2的体积比为2:1。
7.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(2)和步骤(4)中,在主波长340nm、副波长405nm处测定吸光度A1和A2。
8.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述待测样品与试剂R1、试剂R2构成的总试剂的体积比为1:20。
9.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(5)中A1和A2的吸光度变化值为ΔA,即A1数值减去A2数值后的差值。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽伊普诺康生物技术股份有限公司,未经安徽伊普诺康生物技术股份有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710916625.6/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。