[发明专利]稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒及其制备使用方法在审

专利信息
申请号: 201710916625.6 申请日: 2017-09-30
公开(公告)号: CN107703300A 公开(公告)日: 2018-02-16
发明(设计)人: 吴泽东;朱卫中;张金东;吴铮;朱雨;周珍珍 申请(专利权)人: 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司
主分类号: G01N33/573 分类号: G01N33/573;G01N33/531
代理公司: 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙)34124 代理人: 王志兴
地址: 236000 安徽省合肥市包河经济开发区繁*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 稳定 天冬氨酸 氨基转移酶 检测 试剂盒 及其 制备 使用方法
【权利要求书】:

1.一种稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分,包括的成分及相应含量为:

试剂R1:

试剂R2:

2.根据权利要求1所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1的pH为8.0。

3.根据权利要求1所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R2的pH为7.8。

4.一种制备如权利要求1-3任一项所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)配制试剂R1

a.按照试剂R1的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷溶于纯化水中,搅拌均匀,待充分溶解,配制成R1缓冲液;

b.按照试剂R1的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、乙二胺四乙酸二钠盐、迭氮钠、天冬氨酸溶于R1缓冲液中,搅拌均匀,待所有原料充分溶解,调节pH;

c.按照试剂R1的组分含量,将NADH、G6PD溶于上述步骤所得的混合溶液中,搅拌均匀,即制得试剂R1;

(2)配制试剂R2

a.按照试剂R2的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷溶于纯化水中,搅拌均匀,待充分溶解,配制成R2缓冲液;

b.按照试剂R2的组分含量,将三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、α-酮戊二酸溶于R2缓冲液中,搅拌均匀,待所有原料充分溶解,调节pH;

c.按照试剂R2的组分含量,将苹果酸脱氢酶溶于上述步骤所得的混合溶液中,搅拌均匀,即制得试剂R2。

5.一种使用如权利要求1-3任一项所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将待测样品与试剂R1混合均匀,37℃孵育1min;

(2)用全自动生化分析仪测定步骤(1)反应后的吸光度A1,

(3)再与试剂R2混合均匀,37℃孵育2min;

(4)用全自动生化分析仪测定步骤(3)反应后的吸光度A2;

(5)根据A1和A2的吸光度变化值计算出样本中的天冬氨酸氨基转移酶的浓度。

6.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(1)中试剂R1和步骤(3)中试剂R2的体积比为2:1。

7.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(2)和步骤(4)中,在主波长340nm、副波长405nm处测定吸光度A1和A2。

8.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述待测样品与试剂R1、试剂R2构成的总试剂的体积比为1:20。

9.根据权利要求5所述的稳定的天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒的使用方法,其特征在于,所述步骤(5)中A1和A2的吸光度变化值为ΔA,即A1数值减去A2数值后的差值。

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