[发明专利]一种肠道和粪便中短链脂肪酸的检测方法

权利要求书

1.一种肠道和粪便中短链脂肪酸的固相动态微萃取气质联用检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)称取肠道内容物40mg或粪便100mg，置于顶空瓶中，加入纯水1mL，涡旋振荡混匀；

(2)将步骤(1)所得的样品用于固相动态微萃取；

(3)将步骤(2)所得的产物用于气相色谱分析，条件为：色谱柱为VF-WAXms，0.25mm×30m，0.25μm；升温程序为，初始温度70℃，保持lmin，按10℃/min升温速率升温至200℃，保持2min，30℃/min升温速率升温至240℃，保持2min，进样口温度为250℃，载气是高纯度氦气，恒压进样，压力为14.135psi，流速为1.0mL/min，进样方式为不分流模式；

(4)将步骤(3)所得产物用于质谱分析，条件为：扫描范围m/z:30—300，溶剂延迟时间7分钟，传输线、离子源温度分别是250，300℃，倍增器电压值为1853V；

(5)标准曲线的建立，分别称取乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸这6种短链脂肪酸，加入纯水定容，配置短链脂肪酸的对照品溶液，用峰面积对应样品浓度绘制标准曲线；

所述固相动态微萃取的条件为：使用SPDE Syringe needle,coated withPolyethylenglycol,50μm,56mm、萃取次数50次、预热平衡时间为3分钟、预热平衡温度90℃、萃取针温度95℃、萃取流速200μL/s、解析气体体积为1mL；

所述固相动态微萃取采用的萃取头涂层为聚乙二醇。

2.根据权利要求1所述的一种肠道和粪便中短链脂肪酸的固相动态微萃取气质联用检测方法，其特征在于，所述短链脂肪酸为乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸。

3.根据权利要求1所述的一种肠道和粪便中短链脂肪酸的固相动态微萃取气质联用检测方法，其特征在于步骤(5)中，乙酸、丙酸浓度分别取20μg·Kg^-1、50μg·Kg^-1、100μg·Kg^-1、200μg·Kg^-1、400μg·Kg^-1、800μg·Kg-¹，异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸浓度分别取4μg·Kg^-1、8μg·Kg^-1、20μg·Kg^-1、40μg·Kg^-1、80μg·Kg^-1、160μg·Kg^-1、320μg·Kg^-1，独立进样3次，测得峰面积取平均值，制作标准曲线。