[发明专利]阳离子型蒙脱石用于恶性肿瘤细胞DNA分离提纯的方法有效
申请号: | 201710945146.7 | 申请日: | 2017-10-12 |
公开(公告)号: | CN108103053B | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 张毅;杨华明;谢虹忆 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 阳离子 型蒙脱石 用于 恶性肿瘤 细胞 dna 分离 提纯 方法 | ||
1.一种阳离子型蒙脱石在恶性肿瘤细胞DNA分离提纯中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
细胞裂解:
在直径为6 cm的培养皿中培养海拉细胞,后加入500 μL 2%的十二烷基硫酸钠溶液进行裂解,细胞裂解液移入EP管中并在80℃下加热5 min,在振幅为20%、功率为500W条件下超声,冻存于-20℃的冰箱备用;
锂离子型蒙脱石的制备:
向9 mL去离子水中溶解Li2CO3 0.23 g,加入钙基蒙脱石1.00 g,60℃下恒温水浴反应24 h,离心分离,60℃干燥24 h,密闭保存于干燥皿中备用,标记为0.5Li-MMT;
DNA吸附:
取30g/L的锂离子型蒙脱石悬浊液70 μL,加入20 μL细胞裂解液和10 μL pH为5.0的醋酸钠溶液,反应2 min后在5000 g的向心加速度下离心2 min,取上清液并以琼脂凝胶电泳法测定其中的DNA的含量;
DNA脱附:
将已吸附DNA的阳离子型蒙脱石离心分离,所得沉淀物分散于100 μL去离子水中,反应2 min后在5000 g的向心加速度下离心2 min,取上清液并以琼脂凝胶电泳法测定其中的DNA的含量。
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