[发明专利]一种层析介质及其制备方法

权利要求书

1.一种层析介质，其包括层析基质和所述层析基质表面上的功能配基，所述功能配基为经烯丙基缩水甘油醚活化后偶联的N-苄基-N-甲基乙醇胺，

所述层析介质的结构组成为：

其中表示层析基质。

2.如权利要求1所述的层析介质，其中所述层析基质为具有多孔结构和表面羟基的亲水性多孔微球。

3.如权利要求1或2所述的层析介质，其中所述层析基质选自琼脂糖凝胶微球、纤维素微球、葡聚糖微球、聚丙烯酸酯和聚苯乙烯/二乙烯基苯，优选为琼脂糖凝胶微球。

4.如权利要求1所述的层析介质，其中所述层析介质中的所述功能配基的密度为64.5-141μmol/ml介质，优选90-138.5μmol/ml介质。

5.一种制备如权利要求1至4中任一项所述的层析介质的方法，所述方法包括下述步骤：

1)将层析基质用烯丙基缩水甘油醚活化，以得到活化的层析基质；

2)将步骤1)中所述活化的层析基质用溴水进行溴化，以得到溴化的层析基质；

3)将步骤2)中所述溴化的层析基质与N-苄基-N-甲基乙醇胺反应，以得到所述层析介质。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述步骤1)包括用去离子水清洗所述层析基质，抽干，在所述抽干的层析基质中添加硼氢化钠、无水硫酸钠、优选浓度为50％的氢氧化钠溶液，在45-55℃(优选50℃)下反应0.5-2小时(优选1小时)，随后添加烯丙基缩水甘油醚，在45-55℃(优选50℃)下活化8-24小时，得到活化的层析基质；

其中所述步骤2)包括将所述步骤1)中得到的所述活化的层析基质与醋酸钠和去离子水混合，得到混合液，在室温下搅拌所述混合液，同时滴加溴水直至所述混合液变为淡黄色并且1分钟内颜色不再改变，然后添加甲酸钠直至变为无色，过滤清洗，得到溴化的层析基质；并且

其中所述步骤3)包括将所述步骤2)中得到的所述溴化的层析基质与N-苄基-N-甲基乙醇胺、0.1M氢氧化钠溶液和蒸馏水混合，将pH保持为10-12，在45-55℃(优选50℃)下以100-200rpm(优选150rpm)振荡反应8-24小时，抽滤，用去离子水洗涤，得到所述层析介质。

7.如权利要求6所述的方法，其中在所述步骤1)中，硼氢化钠的量，按质量计，为所述层析基质的0.15％-0.5％，无水硫酸钠的量，按质量计，为所述层析基质的5％-15％，50％氢氧化钠溶液的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述层析基质质量的20％-40％，添加的烯丙基缩水甘油醚的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述层析基质的50％-100％；

其中在所述步骤2)中，醋酸钠的量，按质量计，为所述活化的层析基质的2％-5％，去离子水的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述活化的层析基质的20％-50％；并且

其中在所述步骤3)中，N-苄基-N-甲基乙醇胺的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述溴化的层析基质的50％-75％，0.1M氢氧化钠溶液的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述溴化的层析基质的30％-50％，蒸馏水的量，按体积(以ml计)质量(以g计)比，为所述溴化的层析基质的20％-40％。