[发明专利]一种菜籽抗炎肽的分离纯化方法在审

专利信息
申请号: 201710946903.2 申请日: 2017-10-12
公开(公告)号: CN107502644A 公开(公告)日: 2017-12-22
发明(设计)人: 王立峰;袁强;姚轶俊;殷实;徐斐然;鞠兴荣 申请(专利权)人: 南京财经大学
主分类号: C12P21/06 分类号: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
代理公司: 江苏圣典律师事务所32237 代理人: 邓丽,王伟
地址: 210023 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 菜籽 抗炎肽 分离 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种菜籽抗炎肽的分离纯化方法,其特征在于包括以下步骤:

a.将菜籽脱脂处理,得到的菜籽饼粕,并粉碎过筛,得到菜籽粉;将得到的菜籽粉用碱提酸沉的方法制得菜籽蛋白,并冷冻干燥;将得到菜籽蛋白用碱性蛋白酶水解和风味蛋白酶进行分步酶解,得到菜籽蛋白水解物;

b.将步骤a得到的菜籽蛋白水解物通过的超滤膜,收集分子量小于3K的组分;

c.将步骤b收集的分子量小于3K的组分通过葡聚糖凝胶柱分离,得到若干组分,并收集具有紫外吸收峰的组分;

d.将步骤c得到的活性较强的组分通过半制备液相分离,得到若干组分,收集主要的洗脱峰,冷冻干燥后检测各分离组分的抗炎活性,活性最强的即所述菜籽抗炎肽。

2.根据权利要求1所述的菜籽抗炎肽的分离纯化方法,其特征在于步骤b中,将菜籽蛋白水解物配制成质量浓度为0.5-1%的溶液后,反复几次通过的超滤膜,使其超滤的压力控制在0~1MPa范围内,收集小于3K的组分,并冷冻干燥。

3. 根据权利要求1所述的菜籽抗炎肽的分离纯化方法,其特征在于步骤c中,葡聚糖凝胶过滤层析的洗脱条件:以双蒸水为流动相进行洗脱样品,上样浓度1-10mg/mL,上样体积5-10ml,上样流速9-18 mL/h,洗脱流速9-48mL/h,洗脱温度20-32℃,紫外检测波长为280 nm,洗脱液自动部分收集, 将同一分离峰合并,冷冻干燥后检测各分离组分的抗炎活性。

4.根据权利要求1所述的菜籽抗炎肽的分离纯化方法,其特征在于步骤d中,用半制备液相进一步分离,液相条件为:洗脱梯度为0-60min,乙腈5-100%,流速为1-2.46mL/min,紫外检测波长215nm,柱温25-35℃,收集主要的洗脱峰,冷冻干燥后检测各分离组分的抗炎活性,活性最强的即所得菜籽抗炎肽。

5.一种根据权利要求1-4任一项所述方法分离纯化得到的菜籽抗炎肽。

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