[发明专利]一种测定外源dsRNA对瓢虫毒性影响的方法有效
| 申请号： | 201710949193.9 | 申请日： | 2017-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN107858405B | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 潘慧鹏;杨春晓;邱宝利;吴建辉;桑文;王兴民;金丰良 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 测定 dsrna 瓢虫 毒性 影响 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种测定外源dsRNA对瓢虫毒性影响的方法，其特征在于，所述瓢虫为异色瓢虫、七星瓢虫和/或十二星瓢虫；把外源dsRNA均匀混入蔗糖溶液后饲喂刚刚孵化1天的瓢虫幼虫2天后，再用豌豆蚜饲喂，此为处理组；同时以混有砷酸钾的蔗糖溶液为阳性对照，并以混入来源于植物的β-glucuronidase基因dsRNA的蔗糖溶液为阴性对照；在开始饲喂dsRNA后的3、5、7、9天分别取瓢虫样本，应用RT-qPCR进行目标基因v-ATPase A表达量变化的分析；通过比较处理组和对照组瓢虫中目标基因表达量的变化，并观察统计瓢虫的存活率和发育历期，用以评价dsRNA的潜在毒性。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蔗糖溶液的终浓度为10～15％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述阳性对照中砷酸钾的浓度为50～100ng/μl。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，测定在23℃，50％的RH，光照14L：10D的培养箱中进行。
5.权利要求1～4任一所述方法在评价外源dsRNA对瓢虫毒性影响方面的应用。
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