[发明专利]大环内酯类化合物及其在制备防治植物病原性致病菌药物中的应用

说明书

本发明涉及大环内酯类布雷菲德菌素A(BFA)化合物，这些化合物来自三七一株内生真菌的次级代谢产物、经过固体发酵，分离后得到纯品化合物，并使用核磁共振(NMR)及高分辨质谱进行结构鉴定。本发明发现此系列化合物具有拮抗三七致病真菌的活性，并进行了田间回植实验，可以将其开发成具有防治三七植物根腐病致病菌的农药候选化合物。

技术领域：

本发明属于农药技术领域，涉及大环内酯类化合物在制备防治植物病原性致 病菌中的用途。

背景技术：

三七是我国传统中药材，具有抗炎、止血、抗衰老、抗肿瘤等药理活性，具 有巨大药用价值，及市场空间。但是三七属多年生阴生植物，生长过程中病害发 生频繁，其中三七根腐病是影响三七产量的最主要因素。目前对根腐病的防治尚 没有成熟有效的方法，前人对该病的发生与防治作过一些研究。病原菌是导致三 七根部发生腐烂的主要原因之一，真菌病原菌主要包括：柱孢菌、尖孢镰刀菌、 茄腐镰孢菌、立枯丝核菌、轮枝孢霉菌、茎点霉菌，细菌病原菌以假单胞菌为主。 目前我国三七的种植中常用的杀菌剂及农残检出率见图1。常用的杀菌剂大部分 为化学合成杀虫剂，虽然这些杀虫剂效果明显，但是其容易残留在三七根部和土 壤中，不仅对人体健康造成危害，长期使用也会造成环境的污染。所以寻找一种 降解周期短，微生物分泌的天然代谢物，与环境和谐共存的新型农药十分有必要。 内生菌是一类具有重要经济价值的微生物资源，种类丰富，分布广泛，基本上每 一种植物内都含有与之相适应的内生菌。内生菌中含有多种代谢途径，代谢产物 丰富，其对植物修复，元素循环，生物降解和生物转化起重要作用，三七内生真 菌在平衡生态环境促进三七生长过程中起重要作用。目前，已有89株内生真菌 从三七的根、茎、叶和种子中分离出来，63.4％菌株具有拮抗至少一株三七致病 菌的活性。因此，我们从菌株的发酵液具有拮抗三七致病菌角度出发，分离菌株 的代谢物，寻找新型兼顾安全性和用药成本的化合物，作为开发三七农药的候选 化合物。

发明内容：

本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一系列大环内酯类化合物 (BFA系列化合物)及其在制备防治植物病原性致病菌药物中的应用。所述的大 环内酯类化合物对三七致病真菌具有防效高，抑制作用强和残留少，绿色无公害 等优势，大大减少了致病菌基数，成为在防治三七根腐病上很有潜力的农药候选 化合物。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

所述的大环内酯类化合物结构：

本发明所述的化合物来源于一株三七内生真菌的固体发酵物，并通过如下方 法获得：

三七内生真菌(命名为Z1-1031)，分离来自3年健康三七根部，提取基因组 后，NCBI比对结果显示，初步鉴定此菌为Penicillium sp.。

将培养7-10天的新鲜菌落制备成10⁷cfu/ml孢子悬浮液，接种于121℃，灭 菌30分钟的固体大米培养基中，(100ml水)28℃静置培养30-40天。用等体积 乙酸乙酯萃取3-4遍，得到总浸膏后，甲醇：水(8:2-9:1)继续溶解，用等体积 环己烷萃取3-4遍以便除去极性较小的脂肪酸类化合物。然后经过硅胶柱，反相 ODS柱，LH-20凝胶柱，半制备液相等分离手段对样品进行分离纯化，如上所 述得到纯品BFA系列化合物。