[发明专利]一种L-高丝氨酸的生产菌株及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201710953111.8 | 申请日： | 2017-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN109666617B | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 谢新开;徐伟 | 申请（专利权）人： | 四川利尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人： | 程大军 |
| 地址： | 621000 四川省绵*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 丝氨酸 生产 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，其具有单一稳定的染色体，不含质粒形式或其他游离DNA载体，在其染色体DNA上thrB基因被敲除；thrL基因被敲除；thrA基因被突变为thrA*，且所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB和aspA基因被过表达或增强，其中所述rhtA的过表达或增强通过rhtA23实现；
其中所述thrA*基因以额外的不少于三拷贝的形式整合到染色体DNA上而过表达，且所述ppc、pntAB和aspA基因以额外的三拷贝的形式整合到染色体DNA上而过表达；
其中所述L-高丝氨酸的生产菌株由大肠杆菌种属构建。
2.一种L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，其具有单一稳定的染色体，不含质粒形式或其他游离DNA载体，在其染色体DNA上thrB基因被敲除；thrL基因被敲除；thrA基因被突变为thrA*，且所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB、aspA、aspC和asd基因被过表达或增强，其中所述rhtA的过表达或增强通过rhtA23实现；
其中所述thrA*基因以额外的不少于三拷贝的形式整合到染色体DNA上而过表达，且所述ppc、pntAB和aspA基因以额外的三拷贝的形式整合到染色体DNA上而过表达，且所述aspC和asd基因以额外的单拷贝的形式整合到染色体DNA上而过表达；
其中所述L-高丝氨酸的生产菌株由大肠杆菌种属构建。
3.如权利要求1或2所述的L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，所述菌株为大肠杆菌K-12野生型MG1655。
4.一种权利要求1-3任一项的L-高丝氨酸生产菌株的构建方法，包括任意顺序的以下步骤：
A、敲除菌株中的thrB基因；
B、过表达菌株中的rhtA基因；
C、敲除菌株中的thrL基因；
D、突变菌株中的thrA基因为thrA*，所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；
C、在菌株中将thrA*、ppc、pntAB和aspA基因或thrA*、ppc、pntAB、aspA、aspC和asd基因以多拷贝的形式整合到染色体DNA上过表达；
其中所述L-高丝氨酸的生产菌株由大肠杆菌种属构建。
5.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述菌株为大肠杆菌K-12野生型MG1655。
6.如权利要求1-3任一项所述的L-高丝氨酸生产菌株在生产L-高丝氨酸中的应用。
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