[发明专利]一种脂肪SVF细胞临床级高效制备和冻存的方法及其用途

权利要求书

1.一种脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，该制备方法包含：

步骤S1：在无菌条件下采集脂肪样本，保存在保存液中，加入洗涤液对脂肪样本进行预处理；

步骤S2：将预处理的脂肪样本离心，脂肪组织呈黄色，取出脂肪组织并加入等体积已预热的消化液，密封，在恒温条件下使脂肪组织和消化液混合均匀，消化至无大块组织块或虽有大块组织块但聚集大量脂质，离心；

步骤S3：待步骤S2离心结束，去除上层脂质，加入洗涤液将沉淀重悬混匀，过滤，再次添加洗涤液，离心，去除上清液，得到脂肪SVF细胞；

在步骤S1中，所述的洗涤液包含：生理盐水和人血白蛋白；所述的洗涤液选择质量分数20％的人血白蛋白进行配制，所述的生理盐水和20％的人血白蛋白的体积比为100:1；

在步骤S2中，所述的消化液包含：人血白蛋白、0.9％生理盐水、氯化镁和混合胶原酶，所述的消化液选择浓度为200mg/mL的氯化镁水溶液及质量分数为20％的人血白蛋白进行配制，所述的混合胶原酶为厂家Roche的Liberase TM Research Grade；其中，混合胶原酶的质量：20％的人血白蛋白的体积：0.9％生理盐水的体积：氯化镁水溶液的体积比为1mg：5mL：15mL：29μL。

2.根据权利要求1所述的脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，在步骤S1中，所述的保存液包含：氯化钠、青霉素和链霉素。

3.根据权利要求2所述的脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，在所述的保存液中，所述的氯化钠采用0.9％生理盐水；所述的青霉素的浓度为100μg/mL；所述的链霉素的浓度为100μg/mL。

4.根据权利要求1所述的脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，在步骤S2中，所述的消化液预热的温度为37℃。