[发明专利]治疗糖尿病的干细胞制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种治疗糖尿病的干细胞制剂，其特征在于，包括间充质干细胞和胰岛细胞，所述间充质干细胞的浓度为4～6×105个/ml，所述胰岛细胞的浓度为1×106-8个/ml。

2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病的干细胞制剂，其特征在于，还包括15-20ng/ml的低分子肝素钠、青霉素、链霉素、和体积分数为1～3％的多糖。

3.根据权利要求1所述的治疗糖尿病的干细胞制剂，其特征在于，所述间充质干细胞的浓度为5×105个/ml，所述胰岛细胞的浓度为1×107个/ml。

4.一种治疗糖尿病的干细胞制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：制备间充质干细胞的步骤，其包括：

S11：获得人脐带组织，经胶原酶Ⅱ消化，再加入DMEM/F12培养，过滤，收集滤液；

S12：离心滤液，弃上清，将离心沉淀下来的细胞DMEM/F12接种于培养瓶中，移入培养箱中进行培养；

S13：当细胞达融合后，用胰蛋白酶溶液不完全消化进行传代纯化，传至第三代后用完全消化进行传代，得到间充质干细胞悬液；

S2：制备胰岛细胞的步骤，其包括：

S21：获得胰腺组织,去除脂肪，再灌注胶原酶，使胰腺组织膨胀；

S22：在胶原酶工作液中水浴膨胀的胰腺组织，剪碎后继续水浴，至胰腺组织被消化；

S23：再用筛网滤过消化组织液,加入高渗枸橼酸盐嘌呤保存溶液,冰浴至胰腺组织中的胰岛细胞全部游离出来；

S24：再将游离状态的胰岛细胞分离纯化出来,得到胰岛细胞悬液；

S3：配制所述治疗糖尿病的干细胞制剂的步骤，包括：

将所述间充质干细胞悬液添加到所述胰岛细胞悬液中,边添加，边混合,混合均匀后,再添加15-20ng/ml的低分子肝素钠、青霉素、链霉素、和体积分数为1～3％的多糖，混合均匀。

5.根据权利要求4所述的治疗糖尿病的干细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S24中的分离纯化包括以下步骤：

将游离状态的胰岛细胞离心,弃上清,再加入高渗枸橼酸盐嘌呤保存溶液,得细胞悬液；

再在该细胞悬液中加入纯化液,收集层与层之间的胰岛细胞,再离心,弃上清,得到胰岛细胞悬液。