[发明专利]一种高效检测甜味强度的工程化酵母生物系统及其应用在审
申请号: | 201710962610.3 | 申请日: | 2017-10-17 |
公开(公告)号: | CN107513505A | 公开(公告)日: | 2017-12-26 |
发明(设计)人: | 李春;胡鹏晶;贾锦彤;任师超;阳洪宇;白嘉琪;倪江萍;姜恬;吕波 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;G01N21/64;C12R1/865 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 检测 甜味 强度 工程 酵母 生物 系统 及其 应用 | ||
1.一种高效灵敏检测物质甜味强度的工程化酿酒酵母生物系统及其应用,包括在酿酒酵母中表达哺乳动物源的G蛋白偶联甜味受体T1R2/T1R3,结合宿主G蛋白偶联信号通路传导及调控上游信号,以启动下游报告基因的表达作为信号输出,并根据信号输出强度来表征被测物质的甜味强度。
2.根据权利要求1所述的生物系统,其特征在于,将哺乳动物源的甜味受体T1R2/T1R3和G蛋白α亚基GPA1进行相应的修饰和密码子优化,使之适配于上述生物系统,以解决上游信号传导问题。
3.根据权利要求1所述的生物系统,其特征在于,敲除宿主自身对信号通路产生干扰的相关基因,包括sst2、ste2和far1。
4.根据权利要求1所述的生物系统,其特征在于,导入了报告基因表达盒以作为下游输出信号的包括以Pfus为启动子,报告基因(包括荧光蛋白和酶等报告基因)和终止子的诱导型检测线路。
5.一种基于权利要求1所述生物系统的甜味强度检测和标准制定方法。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,以下游检测基因线路的信号输出情况及其强度来表征被测物质是否有甜味及其甜味强度。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,选择一种有甜味的待测物质,分别测定待测物质在不同浓度时的甜味强度,选择合适浓度为标准检测浓度,再以标准检测浓度分别测定多种待测物质的甜味强度,选择合适单位,制作甜味强度标准,可根据不同待测物质的性质制定相应标准。
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