[发明专利]一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法

权利要求书

1.一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

1)腺苷标准溶液配制：

称量腺苷标准品，用腺苷提取液溶解并定容，形成腺苷母液，用该腺苷母液配制成浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL的腺苷标准溶液，备用；

2)样品溶液配制：

称取蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉样品0.5g，加入5mL腺苷提取液溶解混匀，加入50mg石英砂并研磨至糊状，冷却后转移至25mL比色管中并加腺苷提取液定容，用超声波振荡器超声振荡混合，在-20℃环境下冷冻再融化，反复冻融操作两次后冷却并转移至离心机中离心处理，取上清液经0.45um滤膜过滤，制成样品溶液，备用；

3)高效液相色谱法检测分析：

将上述腺苷标准溶液与样品溶液分别注入到液相色谱仪中进行液相色谱分析，以腺苷标准溶液的峰面积A为纵坐标，腺苷标准溶液浓度C为横坐标得到腺苷标准曲线A＝69117C+348.01，将相同时间内样品溶液的峰面积A’带入到腺苷标准曲线中，得到样品溶液中的腺苷含量C’，再根据样品溶液中腺苷含量计算得出蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉样品中的腺苷质量分数。

2.根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：步骤3)中所述腺苷质量分数w采用如下公式进行计算：

w＝(0.25C’/m)*100％

其中：C’为样品溶液中的腺苷含量，单位为mg/mL；

m为蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉样品的质量，单位为g。

3.根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：所述的液相色谱条件为：

色谱柱：Waters Symmetry C185μm4.6×150mm；

流动相：有机相为甲醇，水相为超纯水；

流速：1mL/min；

柱温：25℃；

进样量：20μL；

检测器采用紫外线检测器。

4.根据权利要求3所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：所述流动相的洗脱条件为单一流动相洗脱：甲醇：水＝10：90，洗脱时间12min。

5.根据权利要求3所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：所述紫外线检测器的检测波长为254nm。

6.根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：所述步骤2)中腺苷提取液是质量分数为15％的甲醇溶液。

7.根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：在步骤2)中超声振荡的参数为：温度65℃，频率45KHZ，功率100W，超声振荡时间1h。

8.根据权利要求1所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：步骤2)中离心机转速为3000r/min，离心5min。

9.根据权利要求3所述的蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉中腺苷含量的快速检测方法，其特征在于：所述的超纯水符合《GB/T 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法》中一级水的要求。