[发明专利]一种芜菁萝卜属间异源多倍体的诱导制备方法有效
申请号: | 201710966385.0 | 申请日: | 2017-10-17 |
公开(公告)号: | CN107646683B | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 娄丽娜;吕彦迪;曾玉兰;苏小俊;许园园;刘哲 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01H1/08 |
代理公司: | 南京业腾知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32321 | 代理人: | 李静 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芜菁 萝卜 属间异源 多倍体 诱导 制备 方法 | ||
1.一种芜菁萝卜属间异源多倍体的诱导制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取芜菁萝卜属间远缘双单倍体杂种无性苗的幼芽接种于培养基中,培养15-30d,得到扩繁的芜菁萝卜属间远缘双单倍体无性幼芽;
(2)将经过扩繁的芜菁萝卜属间远缘双单倍体无性幼芽,接种于含0.02wt%秋水仙碱的诱导培养基上,培养24-36小时后,得到诱导后的幼芽;
(3)将诱导后的幼芽转入分化培养基中进行后继培养,得到幼苗;
(4)取后继培养后的幼苗的幼嫩叶片进行流式细胞仪倍性分析,以芜菁萝卜双单倍体杂种的二倍体母本芜菁、父本萝卜,以及经过细胞学鉴定的芜菁萝卜双单倍体杂种为对照,峰值与对照相近的为二倍体,出现显著单个高峰的为整倍体,出现两个或多个高度相近分离峰的为混倍体;
步骤(1)中,所述培养基的配方为:MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂;
步骤(2)中,所述诱导培养基配方为:0.02wt%秋水仙碱+MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂;
步骤(3)中,所述分化培养基的配方为:MS+1mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂。
2.如权利要求1所述的芜菁萝卜属间异源多倍体的诱导制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述后继培养的时长为20-35d,温度为25℃,光照时间16h/d,光照强度为2000lx。
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