[发明专利]复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法

说明书

复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法，步骤：供试品溶液、单味药材供试品溶液和对照品溶液的制备，HPLC色谱条件的确定，指纹图谱的确定；所述高效液相色谱条件为UItimate LP‑C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流速1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长237 nm，乙腈(A)－0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脱。本发明采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》建立的复方大黄清胰汤剂指纹图谱，由42个共有峰色谱信息构成，并通过与各组方药材及对照品保留时间和紫外光谱图比对，对共有峰进行归属并指认了部分色谱峰，改变了单一成分或其中几种有效成分进行质量控制的技术手段。

技术领域

本发明涉及复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法，以及利用上述方法建立的复方大黄清胰汤指纹图谱。

背景技术

中药指纹图谱能更全面的反映药品中化学成分的信息，广泛用于中药材或中成药的质量控制。中药及其制剂均属于多组分复杂体系，评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法。在现阶段，中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要的意义。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材、半成品以及中药制剂质量的真实性、优良性和稳定性。建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。

复方大黄清胰汤剂是遵义医学院附属医院经验方剂，由大黄、赤芍、栀子、延胡索、丹皮、木香、厚朴及芒硝8味药材组成，具有疏肝利胆、清热泻火、止痛通便的功效，临床常用于治疗AP和SAP，疗效显著。现代医学研究表明，清胰复方的作用机制是多方面的，能抑制胰酶释放及其活性，增加肠蠕动；短期内促进肠排空，减轻胃肠压力及腹压；改善胃肠道功能和毛细血管通透性；还可以阻断炎症因子释放，减少炎症因子对患者胰腺等器官的损害；防止细菌移位；清除氧自由基，防止过氧化损伤等。清胰Ⅱ号汤剂所含化学成分复杂，含挥发油、蒽醌类、萜类、甾醇类、木脂素类、生物碱等成分。但目前仅有《中国药典》中采用薄层色谱、HPLC鉴别其中药材和检测主要药效成分的含量，难以全面综合评价该复方制剂的内在质量。

发明内容

本发明的第一目的是提供复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法。

本发明的第二目的是提供一种复方大黄清胰汤指纹图谱。

为了实现上述第一目的，本发明提供复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法，其包括以下步骤：

步骤一：制备对照品溶液：分别配制栀子苷、芍药苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香烃内酯、延胡索乙素对照品储备溶液；再分别精密取上述对照品储备液，加甲醇溶液制得每1 mL含栀子苷、芍药苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香烃内酯、延胡索乙素分别为6～100μg的混合对照品溶液。

步骤二：制备供试品溶液 ：称取复方大黄清胰汤于离心管中，加入适量甲醇，称定重量，超声，放冷，甲醇补足减少的重量， 离心，取全部上清，挥去溶剂，残渣加甲醇溶解并定容至一定体积，摇匀，滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；同法分别制备大黄、赤芍、木香、丹皮、厚朴、栀子、延胡索单味药材供试品溶液；

步骤三：对供试品溶液和混合对照品溶液进行高效液相色谱分析；分别精密吸取样品溶液与参照物溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，记录150min图谱；高效液相色谱条件如下：