[发明专利]负载治疗性蛋白的纳米粒及其微胶囊

说明书

本发明属于纳米医药技术领域，涉及一种负载治疗性蛋白的纳米粒，含有所述纳米粒的微胶囊，制备所述纳米粒或微胶囊的方法，含有所述纳米粒或微胶囊的药物组合物，以及所述纳米粒或微胶囊的用途。

技术领域

本发明属于纳米医药技术领域，涉及一种负载治疗性蛋白的纳米粒，含有所述纳米粒的微胶囊，制备所述纳米粒或微胶囊的方法，含有所述纳米粒或微胶囊的药物组合物，以及所述纳米粒或微胶囊的用途。

背景技术

胰岛素是一种蛋白质激素，由胰脏内的胰岛β细胞分泌，参与调节糖代谢，控制血糖平衡。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。胰岛素的传统给药途径是皮下注射，然而，长期注射会使患者的依从性降低，并产生诸多副作用。

相比皮下注射，胰岛素的口服给药途径具有患者依从性好、经济、方便、安全等优点。胰岛素经口服后，可经肝门静脉进入体循环，直接参与肝脏对葡萄糖的代谢，能够有效地模拟内源性胰岛素的分泌模式和生理作用。但是，胰岛素通过口服途径给药时有以下亟待解决的问题：首先，由于胃中的酸性环境，胰岛素在胃中很容易被降解；第二，胰岛素在消化道内可能被酶降解失活；最后，由于胰岛素的高分子量和低脂溶性，其在肠粘膜上皮细胞的渗透性低，造成口服生物利用度较低。

现有技术中，已经出现了负载胰岛素等蛋白类药物的纳米粒，用于这些药物的口服递送。将纳米粒作为载体，有助于减少胃中的酸性环境和/或酶环境对药物的影响。但是，这些纳米粒往往存在粒径分布宽、表面形态不均匀、生物利用度不高或药效不高等问题。特别地，胃肠道系统中，在肠细胞表面覆盖有黏液层，黏液层中的粘蛋白可通过静电或疏水作用与纳米粒络合，在原位形成较大的聚集体，纳米粒锚定在黏液层中，影响了纳米粒在黏液层中的快速无规则运动，进而阻碍纳米粒在黏液层中的渗透效率。因此，黏液层的存在成为限制口服蛋白类药物递送效率的瓶颈问题。

发明内容

本发明人通过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种负载治疗性蛋白的纳米粒。本发明人利用带负电的聚阴离子对正电的载药纳米核心进行包被，形成外层为带负电的聚阴离子、内部为载药纳米核心的、具有壳核结构的纳米粒。本发明的纳米粒可以通过静电排斥作用，减少其自身与黏液层中粘蛋白的相互作用，增加纳米粒在黏液层中的渗透效率，从而将更多的药物递送至肠上皮细胞。

因此，在一个方面，本申请提供了一种纳米粒，其包含核心和包被在核心上的聚阴离子；所述核心包含治疗性蛋白，还包含细胞穿透肽(CPP)。

在某些实施方案中，所述聚阴离子选自三聚磷酸钠、海藻酸、肝素、透明质酸(HA)、透明质酸盐、硫酸软骨素、聚丙烯酸类聚合物、聚苯乙烯磺酸类聚合物或其任意组合。

在某些实施方案中，所述聚阴离子选自透明质酸、透明质酸盐(例如透明质酸钠)或其组合。透明质酸具有来源广泛、无毒、生物可降解、生物相容性好等特点，适于载药纳米粒的制备。透明质酸在碱性条件下可转化为透明质酸盐。

在某些实施方案中，所述聚阴离子的重均分子量为4kDa-200kDa(例如4kDa-10kDa、10kDa-50kDa、50kDa-100kDa、100kDa-150kDa或150kDa-200kDa)。

本发明的纳米粒中，所述核心包含的治疗性蛋白可以是激素、激素类似物、酶、酶抑制剂或抗体。在某些实施方案中，所述治疗性蛋白为胰岛素。

本发明的纳米粒中，所述核心包含的CPP可以起到载体的作用。CPP被认为具有负载药物活性分子并增强其跨细胞转运的能力。在某些实施方案中，所述CPP包含精氨酸残基。在某些实施方案中，所述CPP的N端为精氨酸残基。在某些实施方案中，所述CPP为Penetratin。Penetratin来源于果蝇的触角足蛋白的同源异形域，由16个氨基酸残基组成，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。Penetratin可以介导多种疏水大分子进入活体细胞质内而不破坏细胞膜的完整性。