[发明专利]一种愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的炼苗移栽方法有效
申请号: | 201710984377.9 | 申请日: | 2017-10-20 |
公开(公告)号: | CN107683768B | 公开(公告)日: | 2019-11-01 |
发明(设计)人: | 舒钰;邢亚娟;李春明;王丹;赵学丽;王钰婷;曹焱 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省林业科学研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 150000 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织 诱导 马丁 香组培苗 移栽 方法 | ||
1.一种愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗的炼苗移栽方法,包括:
1)取愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗进行炼苗5~10d,得炼苗后小苗,所述炼苗的温度为15~18℃,光照强度为800~1000lx,每天光照5~8h,炼苗湿度为70~80%;
2)将步骤1)得到的所述炼苗后小苗移栽至移栽基质中,每天向小苗根部的基质中添加营养液;
所述移栽基质包括河沙和蛭石中的一种和草炭土的混合物;
所述营养液以1/3MS液体培养基和1/3WPM液体培养基为基本培养基,包含2mg/L的IBA和1mg/L的NAA;
所述组培苗的培育方法,包括以下步骤:
a)取暴马丁香的发育下胚轴接种至愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养40~60d,得愈伤组织;步骤a)所述诱导培养的培养基以MS固体培养基为基本培养基,还包括5mg/L的BA和0.5mg/L的IBA;
b)将所述步骤a)得到的愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上,培养40~55d,得愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗;所述不定芽诱导培养基以1/2MS固体培养基为基本培养基,包含0.1mg/L的2,4-D,3mg/L的BA和0.5mg/L的NAA;
所述愈伤组织诱导的暴马丁香组培苗在炼苗前,还包括:将所述组培苗移栽到壮苗培养基上进行壮苗培养,所述壮苗培养的时间为7~12d,所述壮苗培养基以1/6MS固体培养基和1/6WPM固体培养基为基本培养基,pH值为5.8~6.5。
2.根据权利要求1所述的炼苗移栽方法,其特征在于,所述愈伤组织诱导的组培苗,苗高不低于3cm,根数不少于4条。
3.根据权利要求1所述的炼苗移栽方法,其特征在于,步骤2)所述营养液添加在所述移栽基质的表面,所述添加的位置距离所述小苗0.8~1.5cm。
4.根据权利要求1所述的炼苗移栽方法,其特征在于,步骤2)所述营养液共添加13~16d,每天添加的量为15~25ml。
5.根据权利要求1所述的炼苗移栽方法,其特征在于,步骤a)所述诱导培养的条件为:温度20~24℃,光照强度2000lx,光照时间每天10~12h。
6.根据权利要求1所述的炼苗移栽方法,其特征在于,步骤a)所述发育下胚轴的获取方法包括以下步骤:将消毒后的种子接种于MS固体培养基上进行离体培养10d后,切取得到发育下胚轴。
7.根据权利要求6所述的炼苗移栽方法,其特征在于,所述消毒为清洗干净所述种子,清水冲洗1~2h,然后用体积百分含量为75%的乙醇浸泡30s,无菌水冲洗3次,风干后再用质量百分含量0.1%的升汞消毒5~10min,无菌水冲洗3~5次。
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