[发明专利]一种添加鼠尾草酸的猪卵母细胞体外成熟培养液及其应用

权利要求书

1.一种猪卵母细胞体外成熟培养液，其特征在于，由鼠尾草酸以及卵母细胞基础培养液、谷氨酰胺、庆大霉素、孕马血清促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素、卵泡液和血清组成；所述鼠尾草酸的浓度范围为1–20 μM。

2.根据权利要求1所述的体外成熟培养液，其特征在于，所述卵母细胞体外成熟培养液中，所述卵母细胞基础培养液的浓度体积比为70-80%，所述谷氨酰胺的浓度为0.02-0.06g/L，所述庆大霉素的浓度为0.1-0.2g/L，所述孕马血清促性腺激素的浓度为20000-25000U/L，所述人绒毛膜促性腺激素的浓度为10000-15000U/L，所述卵泡液的浓度体积比为8-12%，所述血清的浓度体积比为8-12%。

3.根据权利要求1或2所述的体外成熟培养液，其特征在于，所述卵母细胞基础培养液为Medium199，DMEM，TCM中的一种。

4.根据权利要求1或2所述的体外成熟培养液，其特征在于，所述血清为小牛血清，胎牛血清或新生牛血清中的一种。

5.根据权利要求3所述的体外成熟培养液，其特征在于，所述血清为小牛血清，胎牛血清或新生牛血清中的一种。

6.根据权利要求1、2、5任一项所述的体外成熟培养液，其特征在于，配方如下：

Medium199体积比为75-80%，谷氨酰胺为 0.02-0.06g/L，庆大霉素浓度为0.12-0.16g/L，孕马血清促性腺激素浓度为20000-25000U/L，人绒毛膜促性腺激素浓度为10000-15000U/L，猪卵泡液浓度体积比为8-12%，血清浓度体积比为8-12%，鼠尾草酸浓度为2-5μM。

7.根据权利要求3所述的体外成熟培养液，其特征在于，配方如下：

Medium199体积比为75-80%，谷氨酰胺为 0.02-0.06g/L，庆大霉素浓度为0.12-0.16g/L，孕马血清促性腺激素浓度为20000-25000U/L，人绒毛膜促性腺激素浓度为10000-15000U/L，猪卵泡液浓度体积比为8-12%，血清浓度体积比为8-12%，鼠尾草酸浓度为2-5μM。

8.利用权利要求1-7任一项所述的猪卵母细胞体外成熟培养液培养卵母细胞的应用，其特征在于，将卵母细胞放入平衡后的所述卵母细胞体外成熟培养液中，后置于CO₂体积浓度4%-6%的环境内成熟培养42~44小时，即得。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述平衡具体为：将所述卵母细胞体外成熟培养液平衡至少3小时。

10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述成熟培养的温度为38-39℃。