[发明专利]一种微流体装置及基于微流体装置的单细胞核酸适体单轮筛选方法

权利要求书

1.一种单细胞核酸适体单轮筛选方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1、将靶细胞样品注射进入微流体装置，控制流体速度为50-100微升/分钟，使细胞分散于微流体装置的微室中；

S2、将设计和合成的核酸适体文库与参比细胞孵育，然后离心，弃去与参比细胞结合的核酸适体，将未与参比细胞结合的核酸适体注射进入微流体装置，控制流速为50-100微升/分钟，使核酸适体与微室中的靶细胞结合；

S3、将洗涤缓冲液注射进入微流体装置，通过改变洗涤时间和洗涤缓冲液流速来控制筛选压力，收集洗脱液，将洗脱液中的核酸适体即为筛选后所得的核酸适体；其中，改变洗涤时间的范围为3-10分钟，控制洗涤缓冲液的流速为50-100微升/分钟;

所述微流体装置包括微流体通道(1)，所述微流体通道(1)设有输入口(2)和输出口(3)，所述微流体通道(1)内腔底部设有若干个用于分配单个细胞的微室(4)。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，设计和合成的核酸适体文库序列如SEQIDNO.1所示。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，筛选后所得的核酸适体的序列如SEQ IDNO.2和SEQ ID NO.3所示。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，设计和合成的核酸适体文库序列如SEQ IDNO.4所示。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，筛选后所得的核酸适体序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微流体通道(1)呈U型折流布置。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微流体通道(1)的长、宽、高均为20±0.5微米；所述微室(4)的直径为20±0.5微米，微室(4)的深度为20±0.5微米；彼此相邻的微室(4)之间的间距为2200-2400微米。