[发明专利]一种检测JAK2V617F基因突变的引物组合物及其试剂盒和检测方法

权利要求书

1.一种检测JAK2V617F基因突变的的引物组合物，其特征在于，包括SEQ ID NO：2～SEQ ID NO：6所示序列的引物。

2.根据权利要求1所述的一种检测JAK2V617F基因突变的的引物组合物，其特征在于，还包括如SEQ ID NO：7所示序列的PNA探针。

3.根据权利要求1所述的一种检测JAK2V617F基因突变的的引物组合物，其特征在于，所述SEQ ID NO：4～SEQ ID NO：5所示序列的引物中的至少一个的5'端进行锁核酸修饰。

4.一种含有权利要求1～3中任一项所述的引物组合物的检测JAK2V617F基因突变的试剂盒。

5.根据权利要求4所述的检测JAK2V617F基因突变的试剂盒，其特征在于，还包括反应工作液、Bst DNA聚合酶、去离子水、DNA模板。

6.根据权利要求5所述的检测JAK2V617F基因突变的试剂盒，其特征在于，还包括显色剂。

7.根据权利要求6所述的检测JAK2V617F基因突变的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括反应工作液17μL，SEQ ID NO：2～SEQ ID NO：6所示序列中的每一引物各0.5μL，SEQ ID NO：7所示序列的PNA探针1μL，Bst DNA聚合酶1μL，中性红染料1μL，去离子水0.5μL，DNA模板2μL。

8.根据权利要求7所述的检测JAK2V617F基因突变的试剂盒，其特征在于，所述SEQ ID NO：2～SEQ ID NO：3所示序列中的每一引物的终浓度均为0.2μmol/L；

SEQ ID NO：4～SEQ ID NO：5所示序列中的每一引物的终浓度均为1.6μmol/L；

SEQ ID NO：6所示序列的引物的终浓度为0.8μmol/L；

SEQ ID NO：7所示序列的PNA探针的终浓度为0.8μmol/L。

9.一种用于非诊断和非治疗目的的检测JAK2V617F基因突变的方法，其特征在于，以被测样本的DNA模板，采用权利要求1～3中任一项所述的引物组合物进行LAMP反应，然后采用浊度法或可视化判读来鉴定样本是否为JAK2V617F突变阳性。

10.根据权利要求9所述的检测JAK2V617F基因突变的方法，其特征在于，所述LAMP反应的条件为：55℃-70℃，30-60min。