[发明专利]一种提取利福霉素B的方法

权利要求书

1.一种提取利福霉素B的方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)将利福霉素B的发酵液或利福霉素B发酵液板框滤液依次经微滤膜过滤、超滤膜过滤和纳滤膜浓缩后，得到利福霉素B浓缩液；

(2)将步骤(1)中得到的利福霉素B浓缩液调节pH后用乙酸丁酯进行一次萃取，一次萃取完成后，取有机相并调节pH，进行两级错流反萃取；将反萃取所得水相调节pH后用乙酸乙酯进行二次萃取，得到含利福霉素B的乙酸乙酯相；

(3)将步骤(2)中所得的含利福霉素B的乙酸乙酯相冷冻、结晶并析出晶体后，将含晶体的乙酸乙酯相进行离心，得到利福霉素B晶体；离心所得液体经减压蒸馏结晶后，得到利福霉素B粗品，并加入步骤(2)中反萃取所得水相中，继续进行二次萃取；

步骤(1)中，所述的微滤膜为陶瓷微滤膜，膜孔径为2～500nm；过滤时，温度为10～60℃，压力为0.1～0.6Mpa，膜面流速为2～8m/s；

步骤(1)中，所述的超滤膜为有机卷式超滤膜，截留分子量为10～200KD；过滤时，温度为20～60℃，压力为0.1～2.0Mpa；

步骤(1)中，所述的纳滤膜为有机卷式纳滤膜，截留分子量为100～1000Da；过滤时，温度为20～60℃，压力为0.1～2.0Mpa。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(2)中，进行一次萃取时，步骤(1)中得到的利福霉素B浓缩液经硫酸水溶液调节pH至2.0～2.5；进行两级错流反萃取时，用磷酸缓冲液调节有机相的pH至7.5～8.5；进行二次萃取时，用硫酸水溶液调节水相的pH至2.0～2.5。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)中，冷冻温度为-10～5℃,结晶时间为30min～2h。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)中，离心时，转速为3000～8000rpm，时间为5～20min，离心温度为0～10℃。