[发明专利]一种黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法

权利要求书

1.一种黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1：制备线性梯度溶液、质控品溶液和内标溶液，建立标准曲线；

S2：血浆样品处理；

S3：采用HPLC-MS进行测定；其中，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液；梯度洗脱条件为： 0.0～5.0 min：A流动相： 85%→50%；5.0～9.0 min：A流动相： 50%→30%；9.0～9.5 min：A流动相： 30%→10%；9.5～12.5 min：A流动相：10%；12.5～13 min：A流动相：10%→85%；质谱参数为：离子源为：电喷雾离子源（ESI），检测方式为正离子，毛细管电压为3500V，扫描方式为MRM，氮气温度300℃，氮气流速5L/min，鞘气温度250℃，鞘气流速11L/min，喷嘴电压500V。

2.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述活性成分为黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮或芒柄花素中的一种或数种。

3.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述流动相A和流动相B中甲酸的体积分数为0.1%。

4.根据权利要求2所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述线性梯度溶液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的浓度依次为0.91~468.00ng/mL、0.98~504.00ng/mL、0.94~482.90ng/mL、0.95~489.00ng/mL和0.97~499.80ng/mL范围内的至少5个不同浓度。

5.根据权利要求2所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述质控品溶液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的浓度依次为4.68~468.00ng/mL、5.04~504ng/mL、4.83~482.80ng/mL、4.89~489.00ng/mL和5.00~499.80ng/mL范围内的至少3个不同浓度。

6.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述内标溶液为柚皮素甲醇溶液，所述内标溶液中柚皮素的浓度为294ng/mL。

7.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述血浆样品制备步骤如下：

S1：向黄芪破壁饮片中加入水，研磨均匀得供试药液；

S2：将供试药液灌胃于动物体内，眼眶取血，分离血浆，冷冻备用；

S3：内标溶液置于离心管中，吹干后再加入解冻后血浆、蛋白沉淀剂，混合、超声、离心后取上清液吹干，复溶，混合、超声、离心后所得上清液即为所述血浆样品。

8.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，所述血浆样品的质量浓度为0.14～0.21g/ml。

9.根据权利要求1所述黄芪破壁饮片活性成分的血药浓度定量分析方法，其特征在于，色谱条件为：流速为0.2mL/min；进样体积为2µL；进样温度为20℃；色谱柱为Agilent XDB-C18；柱温箱为30℃；运行时间为13min；洗针液为50%甲醇。