[发明专利]一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记引物及方法

权利要求书

1.一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记引物，其特征在于：所述引物序列为：

Fish F1:5’-TCAACCAACCACAAAGACATTGGCAC-3’；

Fish R2:5’-ACTTCAGGGTGACCGAAGAATCAGAA-3’。

2.一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：提取鲬鱼未定种sp与刀鲬的DNA，以两种鱼的DNA为模板进行PCR扩增，对扩增结果进行纯化、测序，比对测序结果。

3.根据权利要求2所述的一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系组成为：超纯水17.5ul、10×buffer 2.5ul、dNTPs 2ul、rTaq 0.15ul、模板1ul、Primer各1ul。

4.根据权利要求2所述的一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记方法，其特征在于：所述PCR扩增程序为：94℃预变性5min，然后94℃变性45s，50℃退火45s，72℃延伸45s，共进行35个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存∞。

5.根据权利要求2所述的一种鉴别中国沿岸鲬鱼未定种sp与刀鲬的分子标记方法，其特征在于：所述中国沿岸鲬鱼未定种sp的分子标记序列为：

TCTCTATCTAGTATTCGGTGCCTGAGCCGGAATGGTAGGCACTGCCCTAAGCCTGCTTATCCGGGCTGAACTCTGTCAGCCCGGCGCTTTACTGGGGGACGATCAAATCTATAACGTGATCGTTACAGCCCATGCCTTTGTAATAATTTTCTTTATAGTTATACCAATTATGATCGGGGGTTTCGGCAACTGGCTGGTCCCCCTAATGATTGGTGCACCAGACATGGCGTTTCCCCGAATAAACAACATAAGTTTTTGACTCTTACCTCCATCCTTCCTACTCCTTTTAGCCTCCTCAGCCGTAGAGGCTGGGGCAGGAACTGGTTGAACAGTCTACCCGCCCCTGTCAAGTAATCTTGCCCATGCAGGAGCCTCTGTTGACCTAACAATCTTTTCCCTCCATTTAGCAGGGATCTCTTCAATTCTTGGGGCCATCAACTTCATTACAACCATTATTAACATGAAACCTATTGCTATTACCCAATACCAAACACCCCTGTTTGTGTGATCCGTCCTAATTACGGCTGTTCTCCTTCTCCTCTCCCTGCCTGTGTTGGCTGCTGGCATTACAATGCTACTAACAGACCGAAATCTGAACACCACTTTCTTTGACCCTGCAGGAGGAGGGGACCCCATCCTGTACCAACACCTCTT；

刀鲬的分子标记序列为：

TCTCTATCTGGTATTCGGTGCCTGAGCCGGGATGGTAGGCACCGCCCTAAGCTTGCTCATCCGAGCCGAACTCAGCCAACCCGGCGCATTACTAGGAGACGATCAAATCTATAATGTGATCGTTACAGCCCATGCCTTTGTAATGATTTTCTTCATAGTTATACCAATTATAATTGGCGGCTTCGGCAACTGACTGGTCCCCCTAATAATTGGTGCGCCAGACATGGCGTTTCCCCGAATAAACAACATAAGTTTTTGACTCTTGCCTCCATCCTTCCTGCTCCTCCTAGCTTCCTCAGCCGTAGAAGGCGGGGCGGGCACCGGATGAACAGTCTACCCACCCCTGTCGAGCAACCTCGCCCATGCAGGGGCCTCTGTTGACCTAACAATTTTTTCCCTGCATTTAGCAGGAATCTCTTCAATTCTTGGAGCCATCAACTTCATCACAACCATTATTAACATGAAACCTATTGCTATTACTCAGTACCAAACACCCCTGTTKGTGTGGTCCGTCCTAATTACGGCTGTTCTCCTTCTTCTATCCCTGCCTGTTCTGGCTGCTGGTATCACAATGCTACTAACAGACCGAAATCTAAACACCACTTTCTTTGACCCTGCAGGAGGAGGAGACCCAATCTTATATCAACACCTCTT。