[发明专利]PGC-1α特异性RNA干扰腺病毒的应用

说明书

本发明公开了一种PGC‑1α特异性RNA干扰腺病毒在降低白血病细胞耐药性中的应用。本发明PGC‑1a特异性RNA干扰腺病毒能够增加急性髓性白血病细胞对常规化疗药物的敏感性(凋亡细胞比例从25.2±2.5％提高到45.4±5.1％)，进而能够显著延长疾病动物模型的生存时间：以OCI‑AML3细胞制备的白血病小鼠模型为例，白血病小鼠在接受常规化疗情况下平均生存时间为37.9天；在常规化疗基础上，联合PGC‑1a特异性RNA干扰腺病毒治疗，小鼠平均生存时间超过了45天，延长了20％以上。

(一)技术领域

本发明涉及一种PGC-1α特异性RNA干扰腺病毒的应用，特别涉及在制备治疗急性髓性白血病药物中的应用。

(二)背景技术

肿瘤微环境是肿瘤在其发生、发展过程中所处的内环境，由肿瘤细胞本身、间质细胞、微血管、组织液及少量浸润细胞等共同组成。目前关于肿瘤微环境与肿瘤恶变的研究主要集中在以下三方面:(1)肿瘤细胞与其微环境之间双向和动态的关系；(2)肿瘤细胞与其周围组织中的各种类型细胞如何共同作用促进肿瘤侵袭和转移；(3)肿瘤微环境如何介导的肿瘤细胞耐药性产生。上述三个方面既有区别又有联系，回顾过去十年的研究文献，越来越多的研究人员开始接受这样一个观点：肿瘤微环境中的基质细胞以及一些肿瘤细胞外的其他成分能够通过分泌细胞因子、蛋白酶等的方式改变肿瘤组织的营养代谢、影响免疫炎性反应、促进肿瘤新生血管生成，从而有利于肿瘤的侵袭、转移、和耐药性产生；但其中涉及的具体机制尚不完全明确、有待于进一步深入研究，而这些结果将为“瞄准肿瘤微环境来治疗肿瘤”提供理论依据和潜在药物靶点。

药物耐受是现阶段癌症治疗的最大挑战，对于大部分的白血病患者而言，对化疗药物产生耐药性几乎是不可避免、而且也是致命性的。随着细胞微环境研究的深入，“肿瘤微环境赋予了肿瘤抗药物治疗的先天性耐受”的观点正在被广泛的接受：白血病患者临床用药往往达不到预期的效果，其中一个重要原因是复杂的肿瘤微环境给肿瘤干细胞或一小部分肿瘤细胞提供了相应的庇护条件，使它们能抵抗药物作用。从2002年开始，我们团队就通过在体外共培养白血病细胞和健康基质细胞的方式来模拟肿瘤微环境，发现在共培养情况下，对单独培养白血病细胞有显著效果的药物治疗效果明显下降，提出了基质细胞可以保护急性髓细胞性白血病(AML)和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)细胞，减轻化疗药物引发的细胞凋亡的观点。在工作中，我们还系统性地测定了小鼠和人来源6种基质细胞影响12种白血病细胞系对抗肿瘤药物的耐受能力，证明了基质细胞介导的白血病细胞药物耐受非常常见。

在过去的十年中，“微环境介导白血病细胞药物耐受”已经成为全世界关注的研究热点，NCBI pubmed检索相应的文献累积超过了500篇，但其中涉及的机制依然没有完全明了。目前研究人员初步证明的机制主要包括以下几个方面：(1)Integrin途径，研究发现白血病细胞通过细胞表面的整合素与微环境中基质细胞表面的层连蛋白结合，通过细胞间接触激活白血病细胞内PI3K/AKT/Bcl-2信号通路；(2)CXCR4/CXCL12途径，CXCL12可以活化多种细胞粘附、迁移相关的信号分子，促进白血病细胞向骨髓微环境的迁移；(3)HIF1a途径，研究显示骨髓微环境的低氧特性诱导白血病细胞HIF1a的合成，继而调节下游信号通路，促进白血病细胞的增殖。