[发明专利]一种松露和石斛为原料的菌质及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术或保健食品等技术领域，具体涉及一种松露和石斛为原料的菌质及其制备方法。

背景技术

石斛为兰科石斛兰属多年生草本植物，喜在温暖、潮湿、半阴半阳的环境中生长。李时珍在《本草纲目》中称其“强阴益精，久服厚肠胃，轻身延年”。民间称为“救命仙草”“紫楹仙姝”的石斛含有丰富的多糖类、石斛碱等物质，不但具有增强免疫功能的作用，而且能够滋阴养血，是气阴两虚人群清补首选；由于市场需求量大且原生态石斛产量有限，如何高效利用成了目前亟待解决的问题。

松露，别称块菌(truffle)，俗称猪拱菌，是一类与松科、壳斗科、桦木科等高等树木形成典型共生关系的外生菌根真菌，我国松露资源主要分布在四川和云南；松露中含有α-雄烷醇、神经酰胺、块菌多糖等多种生物活性物质，不仅具有抗病毒、抗突变和高效抗氧化性等方面的药理作用，而且其作为男性传统壮阳食用菌备受关注，对女性也有很好的养颜健体的保健价值。块菌子实体在发育的过程中伴有细菌、酵母菌等微生物，块菌根际或子囊果内微生物多样性不仅影响块菌的生长发育，而且对块菌芳香族化合物的产生有不可忽视的作用，研究结果表明块菌特殊香气的产生既来自块菌本身，也来自其体内的细菌(Splivallo et al.2011)。基于GeoChip功能基因列阵分析块菌微生物居群的最新研究结果证实T.borchii子囊果内的细菌可以产生含硫化合物。

运用微生物发酵转化中药材已成为现代中药研究的热点，“神曲”最早见于北魏《齐民要术》，沿用至今已1500余年，它是曲类药的代表，至近代又发展出现了“固体培养”工艺生产猴头培养物等。

发明内容

基于上述原因，申请人经过多年的研究，以石斛作为主要发酵基质，以松露菌液作为菌种，采用真菌双向发酵技术进行发酵，得到一种新的药性菌质制备方法，该方法旨在增加两者的生物活性成分的含量及增强药效，尤其是提高免疫力功效。

本发明通过下述技术方案实现的。

一种发酵菌质，发酵菌质由下述原料制备而成：石斛和松露。

所述的发酵菌质的制备方法包括松露菌液的制备方法和双向发酵方法，其中双向发酵方法包括：固态双向发酵方法或液态双向发酵方法。

其中松露菌液的制备方法为：

(1)取松露子囊果依次用75％酒精处理5min，0.1％升汞处理5min，无菌水充分清洗3次，取最后一次清洗的溶液0.1ml涂布PDA培养基，30℃培养24h后无菌生长则认为表面消毒干净；

(2)将消毒后的松露子囊果用无菌水和无菌研钵适度研碎得到研磨液；

(3)将研磨液涂布于KSP培养基平板，于23-28℃培养，挑取单菌落于KSP培养基平板划线纯化分离，重复4-6次分离纯化培养，直至获得纯培养物；所述的KSP培养基的成分为：麦芽糖30g/L、蛋白胨10g/L、酵母膏10g/L、琼脂20g/L、新鲜石斛浸出汁1L。

(4)将上述获得的纯培养物按照5％(w/v)接入种子培养基，在23-28℃、150rpm条件下培养6-10d得到松露菌液；所述的种子培养基成分为：麦芽糖30g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨10g/L、硫酸镁1g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸铵1g/L，121℃灭菌20min。

其中固态双向发酵的制备方法为：

A、将石斛加入营养液和纯净水匀浆使其含水量为总重量的60-70％，于121℃灭菌20min得到石斛固态培养基；

B、将松露菌液按照10ml/100g接种到石斛固态培养基中，搅拌均匀使料层厚度为3-5cm，放置于23-28℃的培养箱中发酵，至菌丝长满培养基时发酵结束，将固态发酵产物干燥粉碎，得到发酵菌质。

其中液态双向发酵的制备方法为：

A、将石斛与水按质量比1∶5-10混合并打浆，在60℃逆流提取1h后取滤液，加入营养液于121℃灭菌20min得到石斛液态培养基；

B、将10％体积比松露菌液接入石斛液态培养基中，在23-28℃、150rpm条件下发酵6-10d；

C、发酵结束后，将发酵液在常温逆流提取1h，离心过滤后将滤液浓缩干燥，得到发酵菌质。

所述的菌质在提高免疫力食品中的应用。

所述的菌质在与谷物一起发酵制备养生酒中的应用。

本发明所述的菌质为：松露与石斛双向发酵药性菌质，该菌质可以单独作为食品食用，也可以将其与其他成分组合后用于提高免疫力，或者将该菌质单独或与谷物一起发酵制备养生酒使用。