[发明专利]一种在单分子水平同时检测多种DNA糖基化酶的荧光化学传感器及其检测方法和应用有效

专利信息
申请号: 201711027692.9 申请日: 2017-10-27
公开(公告)号: CN107723338B 公开(公告)日: 2020-03-27
发明(设计)人: 张春阳;胡娟;刘明昊 申请(专利权)人: 山东师范大学
主分类号: C12Q1/44 分类号: C12Q1/44;C12Q1/34;C12N15/11;G01N21/64
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 王志坤
地址: 250014 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 分子 水平 同时 检测 多种 dna 糖基化酶 荧光 化学 传感器 及其 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种同时检测hOGG1和hAAG的荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光化学传感器包括:hOGG1分子信标、hAAG分子信标和脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶;

其中,所述hOGG1分子信标为一个具茎环结构的发夹DNA探针,两条茎结构互补形成双链DNA,所述双链DNA具有hOGG1的识别位点;所述分子信标的茎结构两个末端分别用荧光基团I和淬灭基团I标记;所述hOGG1的识别位点为8-羟基鸟嘌呤/胞嘧啶碱基对;

所述hAAG分子信标为一个具茎环结构的发夹DNA探针,两条茎结构互补形成双链DNA,所述双链DNA具有hAAG的识别位点;所述分子信标的茎结构两个末端分别用荧光基团II和淬灭基团II标记;所述hAAG的识别位点为脱氧次黄嘌呤/胸腺嘧啶碱基对;

所述hOGG1分子信标长度为34 nt,所述hOGG1分子信标的碱基序列为:5'-Cy3-GGT CTO ATG GGG GAC ACG ACA CCC CCA TCA GAC C-BHQ2-3',其中下划线标出的碱基序列即为hOGG1分子信标茎结构碱基序列,下划线标出的碱基O即8-羟基鸟嘌呤,所述hOGG1分子信标5'端标记有荧光基团Cy3,3'端标记有淬灭基团BHQ2;

所述hAAG分子信标长度为34 nt,所述hAAG分子信标的碱基序列为: 5'-Cy5-CTC GIG GCA GCT CAG TAC AGG AAG CTG CCT CGA G- BHQ3-3',其中下划线标出的碱基序列即为hAAG分子信标茎结构碱基序列,下划线标出的碱基I即脱氧次黄嘌呤,所述hAAG分子信标5'端标记有荧光基团Cy5,3'端标记有淬灭基团BHQ3。

2.如权利要求1所述的一种荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光基团I与荧光基团II为两个发射光谱之间没有明显光谱重叠和串扰的荧光基团。

3.如权利要求1所述的一种荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光基团I为Cy3,所述淬灭基团I为BHQ2淬灭剂;所述荧光基团II为Cy5,所述淬灭基团II为BHQ3淬灭剂。

4.如权利要求1所述的一种荧光化学传感器,其特征在于,所述hOGG1分子信标和hAAG分子信标茎结构碱基序列长度均为12~13个碱基。

5.权利要求1-4任一项所所述荧光化学传感器和在筛选hOGG1/或hAAG抑制剂/激活剂中的应用。

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