[发明专利]壮药九层楼总黄酮含量测定方法在审
| 申请号： | 201711034076.6 | 申请日： | 2017-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN107860733A | 公开（公告）日： | 2018-03-30 |
| 发明（设计）人： | 朱华;黎理;王晓燕;谢凤凤;戴忠华;张淼 | 申请（专利权）人： | 广西中医药大学 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33;G01N21/31 |
| 代理公司： | 南宁启创知识产权代理事务所(特殊普通合伙)45122 | 代理人： | 经国富 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 壮药九层楼总 黄酮 含量 测定 方法 | ||
1.壮药九层楼总黄酮含量测定方法，其特征在于，先以芦丁为对照品配制成梯度标准溶液，通过紫外-可见分光光度法，测定梯度标准溶液吸光度，建立标准曲线；再将九层楼提取物配制成供试品溶液，测定供试品溶液吸光度，从标准曲线读出供试品溶液浓度，最后根据配制溶液时的稀释倍数计算出九层楼总黄酮含量，具体操作步骤为：
(1)标准溶液的制备：精密称取干燥至恒重的芦丁标准品，加入75％乙醇超声溶解，冷却至室温后定容至刻度，制成浓度为400-500ug/ml的芦丁对照品母液；精密量取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml的芦丁对照品母液分别置于容量瓶中，加入适量75％乙醇，然后依次按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的顺序分别加入5％亚硝酸钠溶液和10％硝酸铝溶液，再按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:10、2:10、3:10、4:10、5:10、6:10的顺序加入10％氢氧化钠溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震荡摇匀，静置，即得不同浓度的标准溶液；
(2)标准曲线的制备：取步骤(1)不同浓度的标准溶液，以未添加对照品溶液为空白，通过紫外-分光光度法，在510nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线；
(3)供试样品溶液的制备：精密称取九层楼提取物，置于三角锥形瓶中，加入75％乙醇溶解并定容；精密量取1ml置于容量瓶中，加入适量75％乙醇，然后依次按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的顺序分别加入5％亚硝酸钠溶液和10％硝酸铝溶液，再按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:10、2:10:、3:10、4:10、5:10、6:10的顺序加入10％氢氧化钠溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震荡摇匀，静置，即得供试样品溶液；
(4)总黄酮含量测定：将供试样品溶液采用紫外-分光光度法，在510nm处测定吸光度，从标准曲线上读取供试品溶液浓度，根据配制溶液时的稀释倍数计算出九层楼总黄酮含量，即得。
2.根据权利要求1所述壮药九层楼总黄酮含量测定方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(3)所述加入5％亚硝酸钠溶液后，放置6min。
3.根据权利要求1所述壮药九层楼总黄酮含量测定方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(3)所述加入10％硝酸铝溶液后，放置6min。
4.根据权利要求1所述壮药九层楼总黄酮含量测定方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(3)所述静置的时间为15min。
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