[发明专利]壮药九层楼总黄酮含量测定方法

说明书

技术领域

本发明属于中药分析技术领域，具体涉及一种壮药九层楼总黄酮含量测定方法。

背景技术

我国壮族主要集中于广西自治区，据该区有关部门调查，壮药共有709种。《壮族民间用药选编》收载常用壮药500多种。具有地方民族特色的壮药主要有：广西马兜铃、千斤拔、龙船花、闭鞘姜，阳桃、两面针、鸡蛋花、刺芋、金锦香、南蛇簕、薯莨、马鬃蛇、褐家鼠、蟒蛇等。

九层楼，别名鹿药、盘龙七、偏头七、螃蟹七、白窝儿七、狮子七，山糜子，为百合科鹿药属植物鹿药的根茎及根，有药用价值。常生于林下及山坡阴处。分布中国西南、西北、东北和华北等地。九层楼，性味“甘、苦、温，无毒”。具有补气益肾、祛风除湿、活血调经功能，用于治疗风湿骨痛，神经性头痛，乳腺炎，月经不调，痈疖肿毒，跌打损伤等。黄酮类化合物是存在于植物界的一类天然色素，为许多中草药的有效成分，赵淑杰等进行了《高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物》的研究，分离纯化鹿药中的化学成分，得到5个黄酮类化合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种准确、快速的壮药九层楼总黄酮含量的测定方法。

本发明通过以下技术方案实现：

壮药九层楼总黄酮含量测定方法，先以芦丁为对照品配制成梯度标准溶液，通过紫外-可见分光光度法，测定梯度标准溶液吸光度，建立标准曲线；再将九层楼提取物配制成供试品溶液，测定供试品溶液吸光度，从标准曲线读出供试品溶液浓度，最后根据配制溶液时的稀释倍数计算出九层楼总黄酮含量，具体操作步骤为：

(1)标准溶液的制备：精密称取干燥至恒重的芦丁标准品，加入75％乙醇超声溶解，冷却至室温后定容至刻度，制成浓度为400-500ug/ml的芦丁对照品母液；精密量取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml的芦丁对照品母液分别置于容量瓶中，加入适量75％乙醇，然后依次按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的顺序分别加入5％亚硝酸钠溶液和10％硝酸铝溶液，再按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:10、2:10、3:10、4:10、5:10、6:10的顺序加入10％氢氧化钠溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震荡摇匀，静置，即得不同浓度的标准溶液；

(2)标准曲线的制备：取步骤(1)不同浓度的标准溶液，以未添加对照品溶液为空白，通过紫外-分光光度法，在510nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线；

(3)供试样品溶液的制备：精密称取九层楼提取物，置于三角锥形瓶中，加入75％乙醇溶解并定容；精密量取1ml置于容量瓶中，加入适量75％乙醇，然后依次按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1的顺序分别加入5％亚硝酸钠溶液和10％硝酸铝溶液，再按照量取的芦丁对照品母液体积，以体积比为1:10、2:10:、3:10、4:10、5:10、6:10的顺序加入10％氢氧化钠溶液，最后加入75％乙醇定容至刻度，震荡摇匀，静置，即得供试样品溶液；

(4)总黄酮含量测定：将供试样品溶液采用紫外-分光光度法，在510nm处测定吸光度，从标准曲线上读取供试品溶液浓度，根据配制溶液时的稀释倍数计算出九层楼总黄酮含量，即得。

作为本发明的进一步说明，步骤(1)和步骤(3)所述加入5％亚硝酸钠溶液后，放置6min。

作为本发明的进一步说明，步骤(1)和步骤(3)所述加入10％硝酸铝溶液后，放置6min。

作为本发明的进一步说明，步骤(1)和步骤(3)所述静置的时间为15min。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明方法简单、准确、快速，精密度、重现性、准确度和稳定性均良好，通过测定壮药九层楼总黄酮的含量，从而有效控制九层楼总黄酮相同物质的质量。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明进一步详细说明，但不限于本发明的保护范围。

实施例1九层楼药材中总黄酮的含量测定，具体操作步骤为：