[发明专利]一种磁分离均相免疫检测目标蛋白的方法

权利要求书

1.一种磁分离均相免疫检测目标蛋白的方法，包括以下内容：

(1)目标蛋白检测抗体标记铕离子荧光微球：以铕离子荧光微球为标记物，通过EDC/NHS活化铕离子荧光微球，将活化的铕离子荧光微球偶联抗目标蛋白检测抗体；

(2)目标蛋白固相抗体标记生物素：目标蛋白固相抗体上标记生物素；

(3)通过表面修饰有链霉亲和素的磁珠分离游离的荧光微球-检测抗体-目标蛋白-固相抗体-生物素，去除过剩标记抗体和过剩待测物；

(4)均相磁分离免疫检测：检测抗体、抗原、固定抗体在酶标板中进行ELISA。

2.根据权利要求1所述检测目标蛋白的方法，其中目标蛋白为降钙素原PCT。

3.根据权利要求2所述检测目标蛋白的方法，其中抗目标蛋白检测抗体为鼠抗人降钙素原检测抗体，目标蛋白固相抗体为鼠抗人降钙素原固相抗体。

4.根据权利要求3所述检测目标蛋白的方法，其中铕离子微球表面修饰有羧基；(1)中EDC/NHS的最佳使用量是320ug/mg微球，微球直径为200nm左右。

5.根据权利要求3所述检测目标蛋白的方法，其中(1)中标记铕离子荧光微球标记buffer是50mM PH7.0MES缓冲液。

6.根据权利要求3所述检测目标蛋白的方法，其中(1)中标记的铕离子荧光微球终浓度为2mg/ml。

7.根据权利要求3所述检测目标蛋白的方法，其中标记抗体微球固含量2ug/ml、固相抗体浓度0.5ug/ml。

8.根据权利要求3所述检测目标蛋白的方法，均相磁免疫检测重组抗原的灵敏度达0.04ng/ml。