[发明专利]一种腐乳菌种的提纯及其应用方法

权利要求书

1.一种腐乳菌种的提纯方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、样品制备：

将普通发酵后的毛豆腐100g溶于生理盐水中，然后将生理盐水中的液体样品接种于无菌PDA平板培养基中，培养3-4天；

S2、样品稀释：

将S1培养完成后的样品用生理盐水稀释1000倍，将稀释后的样品接种于无菌PDA平板培养基中，培养3-4天；

S3、样品再次培养：

将S2培养完成的毛霉菌种再次接种至无菌PDA平板培养基中，培养3-4天；并以几何倍数形式，分别纯化培养，直至得到腐乳发酵有益菌种。

2.根据权利要求1所述的一种腐乳菌种的提纯方法，其特征在于：S1和S2步骤中，生理盐水的质量浓度为0.85％。

3.根据权利要求1所述的一种腐乳菌种的提纯方法，其特征在于：S1、S2和S3步骤中，培养的条件为温度16-32℃，湿度为60％。

4.根据权利要求1所述的一种腐乳菌种的提纯方法，其特征在于：菌种M60的日常保存的条件为：温度16-28℃，湿度为60％。

5.根据权利要求1所述的一种腐乳菌种的提纯方法，其特征在于：菌种M60的长期保存的条件为：温度6-12℃，湿度为60％。

6.根据权利要求1所述的一种腐乳菌种应用方法，其特征在于：在无菌环境中，将培养的菌种M60接种于0.85％的生理盐水中，搅拌20min，制备得孢子悬浮液，将制备的孢子悬浮液接种于豆浆、葡萄糖和无菌水的液体培养基中，培养2天，温度16-32℃，得到液体菌种，将制备的液体菌种置于显微镜下测定孢子浓度，直到孢子浓度为10⁷-10⁸,选取浓度达标的菌种喷洒于鲜豆腐上，将喷洒菌种后的鲜豆腐在16-30℃条件下发酵48-60h，完成发酵。

7.根据权利要求6所述的一种腐乳菌种应用方法，其特征在于：菌种M60接入量为无菌水体积的0.5％。

8.根据权利要求6所述的一种腐乳菌种应用方法，其特征在于：豆浆与无菌水的体积比为1:30。

9.根据权利要求6所述的一种腐乳菌种应用方法，其特征在于：葡萄糖加入量占无菌水体积的4％。