[发明专利]一种槟榔的生物软化方法

权利要求书

1.一种槟榔的生物软化方法，其特征在于，所述槟榔的生物软化方法包括将槟榔深加工中经发籽和清洗后的槟榔置于含微生物的发酵液中进行搅拌发酵，利用微生物产生的复合酶使槟榔软化，得到软化槟榔；

所述微生物为冠突散囊菌菌株；

所述经发籽和清洗后的槟榔与含微生物的发酵液的质量比为1.0～25∶100，所述搅拌的速度为10rpm～80rpm，所述发酵的温度为25℃～40℃，所述发酵的时间为12h～48h；

所述冠突散囊菌菌株为分离自湖南黑茶中的冠突散囊菌菌株，保藏编号为CGMCCNO.5891；

所述含微生物的发酵液通过以下过程制备得到：从活化好的冠突散囊菌菌株的斜面上取1～2环接入50mL～100mL液体培养基中，进行摇床培养，转速为50r/min～200r/min，培养温度为20℃～30℃，培养时间为24h～72h，得到一次培养液，然后按0.5%～3%的接种量进行逐级扩大培养，得到含微生物的发酵液，所述含微生物的发酵液中微生物终浓度为10⁶cfu/mL～10¹⁰cfu/mL；

或者，所述含微生物的发酵液通过以下过程制备得到：按每1cm²试管斜面加入0.5mL～1mL质量分数为0.1%～0.5%的蛋白胨溶液将活化好的冠突散囊菌菌株的试管斜面上的菌株洗脱收集，得到试管菌株洗脱液，然后按照0.001mL/cm²～0.003mL/cm²将试管菌株洗脱液加在固体培养基表面，培养温度为20℃～30℃，培养时间为24h～72h，完成一次培养，再根据所需含微生物的发酵液的量，进行逐级扩大培养，即按照每1cm²加入0.5mL～1mL质量分数为0.1%～0.5%的蛋白胨溶液将上一次培养好的固体培养基表面的菌洗脱收集，得到固体培养基表面菌洗脱液，按照0.001mL/cm²〜0.003mL/cm²将收集的固体培养基表面菌洗脱液加在新制备的固体培养基表面，培养温度为20℃～30℃，培养时间为24h～72h，重复前述扩大培养过程，最后用质量分数为0.1%～0.5%的蛋白胨溶液按0.1mL/cm²～0.5mL/cm²洗脱所得固体培养基表面的菌，收集液体，制成终浓度为10⁵cfu/mL～10⁸cfu/mL的菌悬液，得到含微生物的发酵液。

2.根据权利要求1所述的槟榔的生物软化方法，其特征在于，所述液体培养基主要由蔗糖、麦芽汁、酵母提取物和水组成，原料在水中的浓度如下：蔗糖20g/L～100g/L，麦芽汁5g/L～25g/L，酵母提取物1.0g/L～5.0g/L；所述液体培养基的pH自然，所述液体培养基在115℃～121℃下经过灭菌处理15min～25min。

3.根据权利要求1所述的槟榔的生物软化方法，其特征在于，所述固体培养基主要由蔗糖、麦芽汁、酵母提取物、琼脂和水组成，原料在水中的浓度如下：蔗糖20g/L～100g/L，麦芽汁5g/L～25g/L，酵母提取物1.0g/L～5.0g/L和琼脂16g/L～22g/L；所述固体培养基的pH自然，所述固体培养基在115℃～121℃下经过灭菌处理15min～25min。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的槟榔的生物软化方法，其特征在于，所述搅拌发酵后，于90℃～100℃下灭酶杀菌10min～20min，经清洗后，得到软化槟榔。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的槟榔的生物软化方法，其特征在于，所述软化槟榔的硬度较经发籽和清洗后的槟榔的硬度下降30%～38%。