[发明专利]一种Wright-Giemsa染色试剂及其使用方法在审
申请号: | 201711049078.2 | 申请日: | 2017-10-31 |
公开(公告)号: | CN108414327A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 汝昆;田欣;王占龙;蔺亚妮 | 申请(专利权)人: | 天津协和华美医学诊断技术有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 天津合志慧知识产权代理事务所(普通合伙) 12219 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 301600 天津市静*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 染色 染色剂 细胞 配制 染色试剂 磷酸缓冲液 外周血细胞 标本涂片 清水洗净 生物检材 涂片染色 晾干 骨髓液 脑脊液 胸腹水 滴加 涂片 有效期 鉴别 保存 检查 | ||
1.一种Wright-Giemsa染色试剂,其特征在于该染色试剂是通过以下方法制备的:
1)以重量比为5:1的比例将Wright染料和Giemsa染料混合,以Wright染料与甲醇用量比为1:500(g:mL)的比例取甲醇待用;
2)在研钵内将Wright染料和Giemsa染料的混合物研磨至粉状;
3)取甲醇总体积的1/10加入至粉状物中继续研磨20min,将已溶解的染液倒入棕色试剂瓶内,得到未溶解的固形物;
4)重复步骤3)直至固形物全部溶解,将余量的甲醇全部加入至棕色试剂瓶内;
5)室温条件下密封避光保存1个月。
2.根据权利要求1所述的一种Wright-Giemsa染色试剂,其特征在于所述Wright-Giemsa染色试剂的有效期为5年。
3.一种权利要求1所述Wright-Giemsa染色试剂的使用方法,其特征在于包括以下步骤:向生物检材的涂片上滴加0.25mL所述Wright-Giemsa染液,30s后滴加磷酸盐缓冲液工作液1mL,吹动混匀,20min后用流动水冲洗涂片,晾干。
4.根据权利要求3所述的使用方法,其特征在于所述生物检材是骨髓液细胞、外周血细胞、胸腹水细胞或脑脊液细胞。
5.根据权利要求3所述的使用方法,其特征在于该染色方法中,涂片是位于染片架上完成的。
6.根据权利要求3所述的使用方法,其特征在于所述吹动混匀是用洗耳球完成的。
7.根据权利要求3所述的使用方法,其特征在于所述磷酸盐缓冲液工作液是由以下的母液A和母液B混合得到的,所述母液A是浓度为1%(g/mL)的KH2PO4水溶液;所述母液B是浓度为1%(g/mL)的Na2HPO4水溶液。
8.根据权利要求7所述的使用方法,其特征在于所述母液A和母液B在使用前均分别于棕色试剂瓶中、4℃条件下密封避光保存。
9.根据权利要求8所述的使用方法,其特征在于所述母液A和母液B的有效期均为6个月。
10.根据权利要求7所述的使用方法,其特征在于所述磷酸盐缓冲液工作液是通过以下方法得到的:将所述母液A和母液B以3:2(mL:mL)的比例混合,选取A体积的100/3作为终体积,用水将母液A和母液B的混合物定容至所述终体积。
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