[发明专利]一种扩增布莱凯特黑牛UCK2基因的引物及筛选布莱凯特黑牛优质牛种的试剂盒和方法

说明书

本发明公开了一种扩增布莱凯特黑牛UCK2基因的引物及筛选布莱凯特黑牛优质牛种的试剂盒和方法，该方法是：选择布莱凯特黑牛UCK2基因mRNA表达水平高的布莱凯特黑牛牛种为优质牛种。本发明首次提出以检测UCK2基因mRNA表达水平来筛选优质牛种的方法，为培育优质布莱凯特肉牛品种提供了新的思路。在检测时使用本发明特异的引物和试剂盒，使用qRT‑PCR方法来检测布莱凯特黑牛mRNA水平的表达量，通过mRNA表达水平来判定蛋白质表达水平即可筛选出优质牛种，把转录组测序技术和qRT‑PCR技术结合起来，解决了传统SNP的不稳定性和普通RFLP的局限性，简单、快速、成本低、精确度高、检测结果直观、便于推广。

技术领域

本发明涉及一种扩增布莱凯特黑牛UCK2基因所使用的引物，还涉及筛选布莱凯特黑牛优质牛种的试剂盒和筛选方法，属于动物分子遗传学技术领域。

背景技术

随着生活水平的提高和饮食文化的发展，人们对于肉类的选择不再局限于传统的猪肉、鸡肉等产品。牛肉中的氨基酸组成比猪肉更加接近人体水平，使其更加符合人类健康饮食需要。目前，我国人均牛肉占有量仅5千克左右，而世界平均水平为10千克以上，发达国家的人均占有量高达50千克，所以我国牛肉的需求量仍然有很大的上升空间。我国拥有非常丰富的地方肉牛品种，如秦川牛、鲁西黄牛等，虽然各具特色，但综合生产水平较低，与国外优质肉牛之间还有不小差距，这也是我国牛肉进口逐年增加的原因之一。但是随着消费水平的提高，消费群体的增大，牛种在肉类消费中的比重在逐年攀升，牛种价格也连续走高。消费总量在不断增长的同时，人们对牛种的质量也有了更高的要求，“雪花牛种”、“高档牛种”逐渐成为消费时尚，消费者对高档牛种的需求也越来越迫切。国内现阶段大多数的“高档牛种”主要依赖进口，这一现实状况对我国高档肉牛品种的选育提出了新的挑战。我国肉牛现有五大品种，八大地方品种，但多为兼用型，肉牛的综合生产水平较低，特别是牛种的质量较国外有很大的差距，高档肉牛的培育相对滞后，培育高档肉牛已是必然趋势。因此培育肉质、营养更加优良的肉牛品种是当务之急。

布莱凯特黑牛是一种优质肉牛新种质，是通过体细胞克隆等现代生物技术结合常规育种杂交方法，对当地的鲁西黄牛和渤海黑牛进行改良而获得的优良种质资源。该杂交种质充分显现了杂种优势，保留了和牛肉质特性和部分外表特征，获得了鲁西黄牛和渤海黑牛适应本土环境和地理条件的生理特性。该牛最大特点是肉质好，呈典型的大理石花纹，又称“雪花肉”，细嫩多汁，其牛肉含有丰富的蛋白质，氨基酸组成比猪肉更接近人体需要，能提高机体抗病能力，具有营养心肌、增强抵抗力的功能，同时含铁量丰富，肌间脂肪中饱和脂肪酸含量很低，不饱和脂肪酸含量高，风味独特，肉质鲜嫩，口感好，含有丰富的微量元素及CoQ10，是我国肉牛种质资源中不可多得的优质肉牛新种质。

现今对布莱凯特黑牛优质牛种进行筛选或者培育优质牛种的方法很少有报道，目前常用SSCP和普通RFLP技术进行单核苷酸多态性检测及群体遗传多态性分析，这些方法不稳定，在通常的条件下，突变可能未被检出，因而，实际应用中可能会遇到相当比例的假阴性结果；同时目前的检查技术灵敏度不高，受多种因素的影响，导致重复性差；加之其操作过程复杂，这极大的限制了其在生产中的应用。因此，寻找快速有效的鉴定方法是重中之重。

发明内容

针对现有技术中快速有效的筛选布莱凯特黑牛优质牛种的方法较少的不足，本发明提供了一种筛选布莱凯特黑牛优质牛种的方法，该方法能够快速、简洁的筛选出优质的布莱凯特黑牛牛种，准确性高，为培育肉质、营养更加优良的莱凯特黑牛品种提供了技术支持。

本发明还提供了一种筛选布莱凯特黑牛优质牛种的试剂盒，使用该试剂盒可以方便的筛选出优质牛种，便于应用。

本发明还提供了一种扩增布莱凯特黑牛UCK2基因的引物，该引物能准确的扩增出布莱凯特黑牛UCK2基因，为优质牛种的筛选提供了良好的基础。在黑牛育种过程中发现，布莱凯特黑牛的肉质情况存在差异，并非所有培育出来的布莱凯特黑牛都具有肉质好、营养丰富、风味独特的独特特性，为了使布莱凯特黑牛能持续保持优良的品种就必须不断筛选优良的牛种。