[发明专利]胱氨酸在制备降低阿霉素所致肝脏毒性的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，涉及胱氨酸的一种新用途，即胱氨酸用于制备降低阿霉素所致肝脏毒性的药物中的应用。

背景技术

阿霉素(adriamycin，ADR或多柔比星doxorubicin，DOX)是在1969年由意大利科学家从突变的Streptomyces peucetius的酵解产物中分离出的首个蒽醌类抗生素，其可抑制RNA和DNA的合成，从而对多种肿瘤产生疗效，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有较强的杀伤作用。该药自用于临床治疗癌症以来，被认为是治疗实体瘤的高效、广谱抗癌药，广泛应用于白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌等的治疗。然而，临床报道显示阿霉素化疗的病人常发生心脏毒性、骨髓抑制、肝肾功能损伤、胃肠道反应、脱发等不良反应。由于阿霉素给药后可广泛分布于各组织脏器，因而具有多脏器毒性。阿霉素对正常细胞的毒性作用严重制约其临床应用，其中以心脏毒性最为严重，且呈剂量依赖性，因此相关研究也比较多。不仅如此，有研究报道阿霉素还可引起SD大鼠肝脏细胞核溶解、肝血窦扩大，其诱发肝脏毒性的机制与肝脏转氨酶代谢异常、脂质代谢异常有关。因此，寻找安全无毒、不影响抗肿瘤效应(或具协同增敏作用)并能降低肝脏毒性的药物是扩大阿霉素应用范围的重要研究方向之一。

胱氨酸(Cystine)为氨基酸类药物，可促进机体细胞氧化还原机能，一般用于治疗各种脱发、肝炎、痢疾等，其临床应用效果可靠且安全。目前还没有胱氨酸能有效地逆转肿瘤化疗药物肝毒性的报道。本发明人研究发现胱氨酸对阿霉素引起的肝毒性症状具有显著的改善作用。因此，发明人提出胱氨酸用于制备降低抗肿瘤药物所致肝脏毒性的药物中的应用。

发明内容

本发明以人源乳腺癌细胞MCF-7/ADR接种的荷瘤小鼠作为模型动物，灌胃给予胱氨酸联合腹腔注射给予阿霉素治疗后，通过镜检肝脏组织形态、测定肝功能指标以评价胱氨酸对阿霉素所致肝毒性的改善作用。病理研究结果显示，阿霉素单用组小鼠的肝脏细胞表现出明显的变性坏死，而联用胱氨酸可明显改善这一病变。血清生化指标结果显示，阿霉素单用组小鼠血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)含量显著上调，即阿霉素能够造成小鼠肝脏组织损伤，而胱氨酸联合阿霉素给药后可逆转这一过程，进而改善肝脏功能。以此为基础，发明人提出胱氨酸在制备降低抗肿瘤药物所致肝脏毒性的药物中的应用。

附图说明

附图1荷瘤小鼠肝脏组织病理图片

附图2荷瘤小鼠血清生化指标变化

其中，Control为对照组(给予CMC-Na空白溶液、生理盐水)，ADR为阿霉素单用组(1.5mg/kg/day，腹腔注射)，Cystine supplement为胱氨酸补充组(180mg/kg/day，灌胃)，ADR+Cystine supplement为阿霉素联合胱氨酸组。*P＜0.05，**P＜0.01vs Control。

具体实施方式

本发明通过下面的实施例进行详细的解释，但并不意味着本发明仅限于此。

细胞来源与培养：人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR购于中国医学科学院天津血液病研究所(天津，中国)，细胞培养在37℃，含5％CO₂的环境中，培养液为RPMI1640培养基，含10％胎牛血清(FBS)，以及链霉素100mg/L，青霉素62.5mg/L。细胞生长于10cm培养皿中，2～3天更换培养基一次，待细胞生长至90％融合时进行传代。

动物来源与饲养：采用Balb/c-nu/nu小鼠(雌性，由南京大学模式动物研究所提供，周龄4～6，体重20±2g)进行实验。在标准饲养环境下(自由饮食与饮水，昼夜交替，各12小时)，适应性饲养一周。动物饲养和全部实验于中国药科大学SPF级小鼠饲养室完成。

MCF-7/ADR荷瘤小鼠模型的建立：将MCF-7/ADR细胞消化，无菌PBS重悬后，在小鼠上肢腋下皮下注射入体内进行接种，每只小鼠接种10⁶～10⁷个/0.2mL，每日观察老鼠状态并测量瘤体积。1～2周后，选取出接种成功的荷瘤小鼠(n＝6)，待瘤体达100mm³后，将荷瘤小鼠按体重随机分为4组，开始按照需要给药处理。