[发明专利]一种以肝素为配体的亲和层析介质

权利要求书

1.一种以肝素为配体的亲和层析介质，其特征在于，所述亲和层析介质通过如下方法制备：

1)将20g粒径在30～100μm的中空介孔二氧化硅微球浸泡在0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，在50～55℃下搅拌1～1.5小时使二氧化硅微球活化，将中空介孔二氧化硅微球真空干燥12小时；二氧化硅微球从真空干燥炉中取出后迅速置于含有12g壳聚糖、6g聚丙烯酰胺、1g氢氧化铝、1g氮化硼、30ml乙腈、30ml 0.5mol/L氢氧化钠溶液的悬浊液中，在50～55℃下搅拌反应5小时，真空泵抽干后用去离子水冲洗并干燥，得到附着或者填充复合物的二氧化硅微球内核；

2)向步骤1)所得的微球中加入20mL环氧氯丙烷、10mL二甲基亚砜、20mL浓度为0.5mol/L氢氧化钠溶液，在35～40℃下搅拌反应2～3小时，过滤并用去离子水洗涤干燥后得到环氧化的微球内核；

3)向步骤2)所得的微球中加入5mL多乙烯多胺、45mL浓度为0.5mol/L氢氧化钠溶液，在35～40℃下搅拌反应2～3小时，过滤并用去离子水洗涤干燥后得到胺化的微球内核；

4)向步骤3)所得的微球中加入5g肝素钠、40mL甲醇，在氮气保护下于20～25℃的恒温振荡器中振摇58～60小时，使肝素初步以醛亚胺的形式偶联于微球上；向反应体系中加入2g硼氢化钠，反应3～4小时，将醛亚胺还原，得到最终的以肝素为配体的亲和层析介质。

2.根据权利要求1所述的亲和层析介质，其特征在于，所述氮化硼的粒径小于10μ m 。

3.根据权利要求1所述的亲和层析介质，其特征在于，环氧活化所选用活化剂为30mL烯丙基缩水甘油醚。