[发明专利]一种传统大酱抗疲劳作用的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及大酱抗性技术领域，尤其涉及一种传统大酱抗疲劳作用的检测方法。

背景技术

大豆作为一年生豆科植物，其种子含有丰富的蛋白质、脂肪等成分。我国是大豆的原产地，尤其以东北地区为主要栽培区，是我国人民膳食中主要食品之一。从古至今，中华民族已研发制作出各种各样的大豆制品。其中大豆发酵食品，例如大酱，纳豆等，不仅有独特的风味，而且滋味鲜美，营养也极其丰富。据已有研究表明，这些发酵大豆制品中富含的独特生物活性物质，对人体有多种好处，各种活性物质间相互作用，使得大豆发酵食品能够拥有独特的生理功能。

朝鲜族大酱是我国的一种传统食品，就是以大豆为主要原料，加入面粉等辅助原料经过破碎，制曲等步骤在低温下发酵而制成。研究表明：它可以起到降低胆固醇、抗突变、抗疲劳、抗氧化、抗癌、抗肿瘤等多种生理功能。具有这些功能的主要生理功能性物质分为两类：其中一类是大豆本身的固有成分，即异黄酮类、多肽类、多酚类、皂苷类。另一类则是在微生物及多种酶的共同作用下，使得大豆原料中的蛋白质等大分子有机物，进行分解和重组，经过一系列复杂的生化作用，从而形成了独特的生物活性物质，这就是发酵过程中形成的二次成分，也是发酵大酱生理活性更高的实质所在。

疲劳是指机体生理不能保持其机能在一特定水平上和不能维持预定的运动强度。运动能力快速降低是其主要表现形式，包括能量和做功无法达到目的水平。现已开发的抗疲劳功能成分有辣椒素、抗疲劳肽及牛磺酸等。大豆多肽作为抗疲劳肽产品之一，已受到广泛的认可。大豆多肽的制备，首先是选择优质大豆蛋白为主要原料，然后经过水解、分离和精制等一系列操作最终获得低肽混合物，其通常由3-10个氨基酸组成，这些氨基酸的结构几乎与大豆蛋白一样，其氨基酸中必需氨基酸平衡且良好、含量非常丰富，具有很高的营养价值，是一种较理想的抗疲劳产品。促进红细胞的复原，提高红细胞携氧能力或直接向肌肉供能，抑制氧自由基等为其抗疲劳机理所在。与传统大豆蛋白相比，大豆多肽更易于人体消化吸收，能够迅速给机体供能。在医药、食品等行业有广阔的应用和发展前景。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种传统大酱抗疲劳作用的检测方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种传统大酱抗疲劳作用的检测方法，具体包括以下步骤：

S1、大酱的制作：取实验室自制酱曲2505g破碎后入坛，加入6000ml的水，搅拌均匀，接地衣芽孢杆菌0.06g，放置低温冷藏箱中发酵一周后加无碘盐1270g，使酱中盐浓度控制在13％左右，并于低温冷藏箱中发酵；

S2、实验小鼠的饲养：选取40只健康的雄性清洁级昆明种小鼠，小鼠体重维持在20±2g，相对湿度为45％-65％，室温设置24℃±2℃，要及时供给食物和饮水，使其适应1周后，方可开始试验；

S3、大酱溶液的制备：从S1中取出发酵两个月后的大酱约30g并置于搅拌机中搅碎后分别取4g、8g、16g各加入蒸馏水200ml定容，分别配置成浓度分别为0.02g/ml、0.04g/ml、0.08g/ml的溶液，即大酱低、中、高剂量；

S4、受试物剂量设计：将S2中的小鼠随机分成四组，并用标号标记，即空白对照组、低浓度大酱溶液组、中浓度大酱溶液组、高浓度大酱溶液组，将S3中低、中、高剂量分别设定为0.2g/kg/d、0.4g/kg/d、0.8g/kg/d，并经口灌胃摄入受试物，同时空白对照组灌以等体积的蒸馏水；

S5、小鼠爬杆时间的检测：在每次大酱溶液灌胃30min后，分别将各组小鼠依次放置于爬杆架的有机玻璃圆柱上，圆柱直径0.8～1.0cm，下端距水面约20cm，用秒表记录小鼠从被放上圆柱到滑落水中间隔的时间，累计3次作为小鼠的爬杆时间；

S6、小鼠负重游泳时间的检测：在每次灌胃30min后，在各组小鼠尾部负重5％体重的铅皮，分别将负重小鼠依次放于游泳箱中，进行力竭性游泳试验，力竭标准为小鼠的嘴和鼻子在水面下8s不抬头，则可判定小鼠力竭，记录每只小鼠自游泳开始至力竭沉入水中死亡的时间，将其作为小鼠的游泳时间；

S7、小鼠体重及脏器系数的检测：试验过程中，每3d进行一次小鼠体重的测量，解剖后测定不同试验剂量组小鼠不同脏器的湿重，计算它们与单位体重(100g)的比值，计算出脏器系数；

S8、小鼠肝糖原、肌糖原储备量的检测：

1)葡萄糖标准曲线的绘制