[发明专利]纳豆激酶活力的检测方法、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备血栓管

取数根毛细管，分别吸取凝血酶液后，再吸取纤维蛋白原溶液，吸取的所述凝血酶液的体积与所述纤维蛋白原溶液的体积比为1:100～1:20，然后密封所述毛细管的非吸取端，静置，待所述毛细管中的溶液凝固后形成血栓，即得所述血栓管，并分别记录所述血栓的长度，作为第一血栓长度；

(2)溶解血栓

配制不同浓度梯度的尿激酶标准溶液，将(1)中制备的所述血栓管分别置于不同浓度的所述尿激酶标准溶液中，再密封所述尿激酶标准溶液，分别在相同温度下，反应相同时间后取出，其中，溶解血栓的反应温度为30℃～40℃，反应时间为24h～72h；所述血栓管内有液体状物质生成；

(3)测定所述标准溶液的溶栓长度

使用加热法除去步骤(2)中生成的所述液体状物质，并记录血栓管中剩余的所述血栓的长度，作为第二血栓长度，所述溶栓长度为所述第一血栓长度减去所述第二血栓长度；

(4)绘制标准曲线

绘制所述尿激酶的浓度与所述溶栓长度的标准曲线；

(5)测定待测纳豆激酶样品的酶活力

将待测纳豆激酶样品溶液采用与步骤(2)相同的操作，得到与待测纳豆激酶样品反应后的血栓管；

将与所述待测纳豆激酶样品反应后的血栓管，采用与步骤(3)相同的操作，测得待测纳豆激酶样品的溶栓长度；

根据步骤(4)的标准曲线和所述待测纳豆激酶样品的溶栓长度计算所述待测纳豆激酶样品的酶活力。

2.根据权利要求1所述的纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，所述加热法的具体操作为：取出所述血栓管，将接触样品的一端朝上，在竖直状态下靠近火焰，并来回摆动所述血栓管，使血栓管内所述液体状物质受热沸腾喷出，直至连续加热一段时间后无液体喷出，停止操作。

3.根据权利要求1所述的纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，在制备所述血栓管时，在所述纤维蛋白原溶液中加入染液。

4.根据权利要求1所述的纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，在制备所述血栓管时，在所述纤维蛋白原溶液中加入pH为7.5-9的缓冲溶液。

5.根据权利要求4所述的纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液或巴比妥-氯化钠缓冲液。

6.根据权利要求1所述的纳豆激酶活力的检测方法，其特征在于，所述密封为蜡密封。

7.权利要求1-6任一权利要求所述的纳豆激酶活力检测方法在大批量待测纳豆激酶样品的高通量筛选中的应用。