[发明专利]一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法有效

专利信息
申请号: 201711066602.7 申请日: 2017-11-02
公开(公告)号: CN107688073B 公开(公告)日: 2020-12-04
发明(设计)人: 肖水水;张伟;王丽娜 申请(专利权)人: 威海百合生物技术股份有限公司
主分类号: G01N30/88 分类号: G01N30/88
代理公司: 济南日新专利代理事务所(普通合伙) 37224 代理人: 李蕾蕾
地址: 264321 山东省*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 磷脂 丝氨酸 含量 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法,其特征在于:其经过以下步骤:

(I) 标准溶液配制与绘制标准曲线

准确称取120mg标样磷脂酰丝氨酸,溶解于25mL的体积比为90/10的氯仿/甲醇的溶剂中配成标准溶液,超声使粉末充分溶解,置于4℃环境下保存,随后以 10、15、20、25ul和30ul标准溶液进样,做出标准曲线;

(II)试样溶液配制

准确的重复称取市售的一定量的含磷脂酰丝氨酸的压片糖果, 将压片糖果先研磨至细粉状态后加入到50ml的容量瓶中,加入10ml的体积比为90/10的氯仿/甲醇溶液,涡旋振荡分散均匀后,超声5min,冷却至室温,用氯仿/甲醇溶液补足至50mL,摇匀,配制成样品液,经0.45um微孔滤膜过滤,进样;

(III)进样检测

将标准溶液、样品溶液在如下特定色谱条件下进行测定:色谱柱:LiChrosphere 100diol:4mm×125mm;流动相:流动相A为正已烷-异丙醇-乙酸-三乙胺的体积比是810:180:10:0.8,流动相B为异丙醇-水-乙酸-三乙胺的体积比是860:130:10:0.8;梯度洗脱条件如下表:

步骤运行时间,min流动相A,%流动相B,%
101000
2106040
3150100
4201000

流速:1.2mL/min;柱温:37℃;进样量:5μL;检测器参数:2000型蒸发光散射检测器,漂移管温度95℃,载气流速3.0L/min;在洗脱过程中样品的保留时间跟标准样品相比作定性分析;

(IV)磷脂酰丝氨酸的含量计算

以标准溶液峰面积做对数后为纵坐标,标准溶液浓度做对数后为横坐标,绘制双对数标准曲线,根据峰面积从双对数标准曲线查得样品溶液浓度,进行定量分析,通过测出的样品的响应值从标准曲线上计算出最终磷脂酰丝氨酸的浓度。

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