[发明专利]一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法，其解决现有检测方法存在保留时间过长、峰形不佳的问题。其经过以下步骤：（I）绘制标准曲线：准确称取磷脂酰丝氨酸标样配成标准溶液，随后使用梯度洗脱条件进行高效液相色谱分离；（II）将待测样品制备成适合进行高效液相色谱进样的液体样品；（III）使用梯度洗脱高效液相色谱来分离待测样品，所述的梯度洗脱条件和步骤I的梯度洗脱条件相同；（IV）随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积，并且按照步骤I得到的拟合方程来得到样品中的磷脂酰丝氨酸浓度。本发明采用高效液相色谱配合蒸发光检测器为该原料或成品的检测提供了一个准确快速、灵敏度高的检测方法。

技术领域

本发明涉及利用吸附作用，例如色谱法将材料分离成各个组分来测试材料，尤其是一种在原料和成品中检测磷脂酰丝氨酸含量的检测方法。

背景技术

磷脂酰丝氨酸作为新食品原料，由于其独特的健脑益智功效，逐渐被应用到各类食品和保健品当中，但检测方法缺失，尚无国家、地方或行业等统一的标准对其含量的检测方法进行规定，这就导致在含磷脂酰丝氨酸的原料品质控制和成品质量控制方面无统一的依据。

目前，公开的磷脂酰丝氨酸的检测方法有两种，第一种是：2016年2月3日公开的申请号为：201510874442.3的中国发明专利申请说明书中公开的“一种磷脂酰丝氨酸的高效液相色谱分析方法”；第一种是：2014年6月25日公开的申请号为201410145181.7的中国发明专利申请说明书中公开的“一种食品中磷脂酰丝氨酸含量的检测方法”。这两种公开的专利文献中涉及的方法均是使用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器进行含量检测，上述公开文件中针对产品中的磷脂酰丝氨酸的含量不同，在样品前处理阶段存在差异，而在后续的检测阶段，仪器参数存在差异。但上述公开的检测方法仍存在保留时间过长、峰形不佳、理论板数低等问题。因此，关于食品中磷脂酰丝氨酸的含量的检测方法，尚不成熟，还需要建立一种色谱峰分离较好，具有准确快速、高灵敏度、重现性好、回收率高的磷脂酰丝氨酸的检测方法。

发明内容

为了克服现有检测方法存在保留时间过长、峰形不佳的不足，本发明的目的是提供一种磷色谱峰分离较好、准确快速、高灵敏度的脂酰丝氨酸含量的检测方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法，其特征在于：其经过以下步骤：

（I）绘制标准曲线：准确称取磷脂酰丝氨酸标样，并且溶于氯仿/甲醇溶液，配置成标准溶液，随后将4-10组梯度体积的标准溶液进行高效液相色谱分离，所述的梯度洗脱条件是：高效液相色谱柱为球形硅胶正相柱；柱温为30-40摄氏度；流动相A：正已烷、异丙醇、乙酸和三乙胺的体积比是810:160-200:8-12:0.6-0.10；流动相B：异丙醇、水、乙酸和三乙胺的体积比是860: 110-130:8-12:0.6-0.10；在0-10分钟，流动相A和B的流速比为100:0；在10-15分钟，流动相A和B的流速比为60:50-30；在15-20分钟，流动相A和B的流速比为0:100；随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积，并且将峰面积对各组样品的浓度做出标准曲线，拟合出一元一次方程，所述的氯仿/甲醇溶液的氯仿体积分数为85-95%；

（II）将待测样品制备成适合进行高效液相色谱进样的液体样品；

（III）使用梯度洗脱高效液相色谱来分离待测样品，所述的梯度洗脱条件和步骤I的梯度洗脱条件相同；

（IV）随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积，并且按照步骤I得到的拟合方程来得到样品中的磷脂酰丝氨酸浓度。