[发明专利]一种二苯醚类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种二苯醚类化合物及其制备方法和应用。所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C₁₈H₂₀O₅，结构式为：该化合物命名为：diphentherB；所述福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株，菌株保藏编号为CCTCC M 2017632，保藏日期为2017年10月23日。所述的制备方法是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株的固体发酵物为原料，经有机溶剂提取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤。所述的应用为所述的二苯醚类化合物在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物中的应用。本发明化合物结构新颖，化合物活性好，有较好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种二苯醚类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

1978年，医务人员在上海抽检了200株金黄色葡萄球菌，分离出的甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）还不到5%。2009年对住院病人的抽样调查显示对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）超过60%，同比2000年增长了40%。中国医科大学微生物学院的朱宝丽及其同事曾对中国、丹麦、西班牙人肠道菌群的DNA进行测序，研究显示：中国人肠道菌群具有更多的耐药基因。因此研发能有效控制耐药细菌感染的新策略和新药物，成为抗菌素研究的热点。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种二苯醚类化合物；第二目的在于提供所述的二苯醚类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的二苯醚类化合物的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C₁₈H₂₀O₅，结构式为：

该化合物命名为：diphentherB；

所述福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株，菌株保藏编号为CCTCC M2017632，保藏日期为2017年10月23日。

本发明的第二目的是这样实现的，包括以下步骤：

A、固体发酵：将菌株福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中于28℃培养7天，接种到含10~100mL液体种子培养基的50~500mL的三角瓶中，于28℃下在转速180rpm旋转震荡的条件下震荡培养5~10天得到含菌营养基，将其接种到大米固体培养基中培养得到发酵产物；

B、浸膏提取：将发酵产物中加入固液体积比1.5~3倍的有机溶剂超声提取2~4次，每次4~8h，合并提取液，过滤，减压浓缩至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩得到浸膏；

C、氯仿-丙酮硅胶柱层析：浸膏上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为浸膏重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的氯仿和/或丙酮溶液梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；

D、石油醚-乙酸乙酯硅胶柱层析：将C步骤中8:2配比的氯仿-丙酮混合溶液进行洗脱得到的洗脱液上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为洗脱液重量6~8倍，用体积比为1:0~0:1的石油醚和/或乙酸乙酯溶液梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；

E、高压液相色谱分离纯化：将D步骤中7:3配比的石油醚-乙酸乙酯混合溶液进行洗脱得到的洗脱液以40~60%的甲醇为流动相，以规格为20mm×250mm、5μm的C₁₈制备柱为固定相，流速为20mL/min，紫外检测器检测波长为284nm，每次进样200μL，收集洗脱液，多次累加后蒸干，即diphentherB。