[发明专利]一株降低三七根腐病发病率的内生真菌及其菌剂

权利要求书

1.一株降低三七根腐病发病率的内生真菌，其特征在于，所述菌株为枝孢菌(Cladosporium tenuissimum)，保藏编号为：CGMCC No.14126。

2.一株降低三七根腐病发病率的内生真菌菌剂，其特征在于，通过如下方法制备：

(1)培养基制备

种子制备培养基PDA 1L：150-200g去皮马铃薯水提物，葡萄糖15-20g，琼脂粉17-20g，加水至1L，pH自然，配置后于121℃灭菌30分钟；

固体发酵培养基：麦麸300-350g，玉米粉50-100g，豆饼粉10g，KNO₃ 0.5g，K₂HPO₄1.5g，NaCl 1.5g，CaCO₃ 4g，加水400ml，121℃灭菌30分钟；

(2)菌种活化和种子制备

菌种活化：取冻干管中的真菌孢子，接种到PDA平板上培养，待长出菌落后挑取菌落接种到PDA平板上继续培养5-7d；

孢子悬浮液制备：

a.将活化后的权利要求1所述的枝孢菌(Cladosporium tenuissimum)菌株接种到PDA平板上培养，用无菌水洗脱孢子配制成孢子悬液；

b.取孢子悬液涂布于PDA平板上，将涂布的平板置于25-28℃培养，用无菌水洗脱孢子，配制成孢子悬液；

(3)菌剂制备

菌剂固体发酵：将孢子悬浮液接种到固体基质中，25-28℃培养，培养3-4d后在无菌条件下进行一次搅拌，搅拌后继续培养4-5d，得到固体发酵菌剂；

菌剂干燥：将所得固体菌剂放在30-35℃的干燥箱内，鼓风烘干25-30h，将固体菌剂烘干至含水量在10-20％以下，包装，置于干燥处。

3.如权利要求2所述的内生真菌菌剂，其特征在于，步骤(2)中的培养温度是25-28℃。

4.如权利要求2所述的内生真菌菌剂，其特征在于，步骤(2)孢子悬浮液制备中，a中所述的孢子悬液的浓度为：1.0×10⁶-1.0×10⁷个/mL，b中所述的孢子悬液的浓度为1.0-5.0×10⁶个/mL。

5.如权利要求2所述的内生真菌菌剂，其特征在于，步骤(3)固体发酵过程中，孢子悬浮液的接种浓度为：1.0-5.0×10⁶个/mL。

6.如权利要求2所述的内生真菌菌剂，其特征在于，步骤(3)制备的菌剂的活菌数1.0-5.0×10⁸个/g。

7.权利要求1所述的一株降低三七根腐病发病率的内生真菌在制备内生真菌菌剂中的应用。

8.权利要求1所述的一株降低三七根腐病发病率的内生真菌在制备治疗三七根腐病药物中的应用。

9.权利要求2所述的一株降低三七根腐病发病率的内生真菌菌剂在制备治疗三七根腐病药物中的应用。