[发明专利]14到16度黄酒非糖固形物简便快速测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及非糖固形物检测方法，特别涉及一种14到16度黄酒非糖固形物简便快速测定方法。

背景技术

黄酒是我国的特色酒种，其色泽明亮、香气浓郁、甘甜味美、风味醇厚，并含有丰富的氨基酸、小分子糖类、有机酸、维生素和微量元素等。黄酒由于其营养丰富、酒精度低且具有独特的风味口感和功效而深受广大人民群众的喜爱。非糖固形物是酒样中除糖外的非挥发性组分的统称，其在黄酒中的占比很小通常不足3%。虽然含量低，非糖固形物作用却很大，它很大程度上决定了黄酒的色泽、滋味、营养和功效，是黄酒品质等级评定的一项重要指标。按照国标GB/T 13662-2008《黄酒》中参数，同一类型的黄酒中非糖固形物含量越高，黄酒的品质越好、口味越佳。

现行的黄酒国标中采用的是4h烘干法来测定酒样中的非糖固形物含量，这种方法耗时长，而且存在酒样烘干4h后质量未达到恒重的情况，不利于快速测定、精确测量和批量检测。此外，还有基于近红外光谱建立的酒样非糖固形物快速测定方法，但是这种方法需要借助于贵重的设备，而且需要耗费较高的检测成本。因此目前亟需建立准确可靠、简便快速且经济实用的黄酒非糖固形物测定方法。

乙醇含量即酒精度和总糖含量是黄酒的必测指标，单位体积的酒样质量可以很容易称定，此时若能测出酒样中乙醇水体系的总质量，则酒样质量减去乙醇水体系质量再减去总糖就可以得到非糖固形物质量。本发明利用特定双链DNA片段在不同水和乙醇质量体积比的乙醇水体系中变性程度不同导致260nm波长下吸光度有所差异，从而建立起一种全新的14到16度黄酒中非糖固形物测定方法，具有准确可靠、简便快速且经济实用的特点，适合于酒厂检测实际需求。

发明内容

本发明的目的在于提供14到16度黄酒非糖固形物简便快速测定方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案为，14到16度黄酒非糖固形物简便快速测定方法的主要步骤如下：

（1）在黄酒品质检测中，按照现行国标先测定其酒精度v这一必测指标，同时称定1L酒样质量Mo，测定酒样的温度并据此查询乙醇密度ρ。

（2）移取320ul室温待测黄酒酒样到空的酶标板中，加入40ul初始变性剂和40ul特定双链DNA片段并充分混匀后静置4min，同时设置对照孔为320ul待测酒样加40ul初始变性剂加40ul蒸馏水，待测酒样和对照均取平行测三次，样本处理好后将酶标板置于酶标仪中。

（3）设定好酶标仪程序在260nm波长下测定样品孔和对照孔中的吸光度，则样品的平均吸光度减去对照的平均吸光度即为样品中特定双链DNA片段的实际吸光度x。将x代入关系式y=-11.349x+7.836中则可算出酒样中水和乙醇的质量体积比y，则酒样中总固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v也即M=Mo-10×（ρ+y）×v，进而非糖固形物含量m=M-Mt，Mt为总糖含量。

其中，步骤（1）中所述的黄酒是指国标法测定酒精度v大于等于14.0且小于等于16.0的黄酒；所述酒精度v是黄酒品质检测的必测指标，原本就有可直接采用；所述1L酒样质量Mo的测定方法为：在按国标法测定酒样酒精度时，量取100ml酒样后称量装有酒样的容量瓶重，则该重量扣除空容量瓶重即为100ml酒样重量，经换算即可得到1L酒样质量Mo，其单位为g/L；所述酒样温度为正常室温即可，优选地，控制在30.0±5.0℃之间。

其中，步骤（2）中所述的初始变性剂是8%质量体积分数的尿素和8%体积体积分数的甲酰胺混合水溶液，即每100ml初始变性剂中含有8g的尿素和8ml的甲酰胺；所述的特定双链DNA片段，其序列如SEQ ID NO：1所示，浓度为20umol。

其中，步骤（3）中所述的平均吸光度是指三个平行的吸光度的算术平均值；所述总固形物含量M=Mo-10×ρ×v-10×y×v，其中10×ρ×v即乙醇密度乘以酒精度也就是100ml酒样的乙醇体积含量再乘以10，就可以得到1L酒样中的乙醇质量；而10×y×v即乙醇体积乘以水和乙醇的质量体积比再乘以10，就可以得到1L酒样中的水质量，则10×（ρ+y）×v实际上就是1L酒样中乙醇水体系的质量之和；因此总固形物含量M=Mo-10×（ρ+y）×v，也即1L酒样总质量减去其中的乙醇水体系质量则为1L酒样中的总固形物含量，其单位为g/L；进而非糖固形物含量等于总固形物含量减去总糖含量也即m=M-Mt，而总糖含量Mt是黄酒品质检测的必测指标，原本就有可直接采用，其单位为g/L。