[发明专利]一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法

权利要求书

1.一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法包括以下步骤：菌体分离培养、一级种子平板培养、二级种子固体培养、稳定处理、三级种子固体培养、规模固体培养。

2.一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法包括以下步骤：

1）菌体分离培养：用淡紫拟青霉菌株在PDA培养基上培养，并进行转管培养；

2）一级种子平板培养：向转管培养后的菌种管中加入含吐温80的无菌水，制成孢子悬浮液，吸取孢子悬浮液接到PDA平板培养基上在温箱里培养；

3）二级种子固体培养：将麸皮和玉米粉混合得料，水和料混合，灭菌；接种孢子悬浮液后培养，待料表面全部变白后，移入室温条件下继续培养；

4）稳定处理：将二级种子放入恒温箱，以0.5-1℃的升温速率升温至28℃，然后以0.5-1℃的降温速率降温至-4℃，再升温至25℃；

5）三级种子固体培养：将二级种子菌种和水、料混合，连续培养 2-10天；

6）规模固体培养：所述的规模培养，包括培养料的准备、混合方法、平面培养和粉粹包装。

3.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述稳定处理，将二级种子放入恒温箱，22℃保持45min后，以0.5-1℃的升温速率升温至28℃，恒温40min，然后以0.5-1℃的降温速率降温至-4℃，恒温15min，再以1.5-2℃的升温速率升温至25℃，保持恒温。

4.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述二级种子固体培养，将麸皮和玉米粉按10-1:1的比例混合得料，水和料按1：1-10比例混合，灭菌；接种孢子悬浮液，置于25℃温箱培养，待料表面全部变白后，3天翻料一次，移入室温条件下继续培养10d。

5.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述三级种子固体培养，将麸皮和玉米粉按10-1:1的比例混合，二级种子淡紫拟青霉菌种和水、料按1：10-100:1-100的比例混合，然后将培养料铺在瓷盘上，在室温条件下培养，控制好温度，连续培养 2-10天，然后封闭阴干后粉粹，包装存放。

6.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述三级种子固体培养，培养料铺在瓷盘上的厚度为1-10cm。

7.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所述平面培养，将混合后的培养料摊铺在平整的地面上，厚度为1-10cm，在18-28℃条件下进行发酵培养；1天后和培养基干燥结块，在培养基内布满白色菌丝后翻动一次，连续培养2-10天后，进行通风阴干。

8.根据权利要求2所述的一种淡紫拟青霉菌剂的固体培养生产方法，其特征在于，所得到的一种淡紫拟青霉菌剂，有效孢子量为2.0-2.2×10⁸cfu/g，杂菌率≤0.1%，脱落率≤3%。