[发明专利]检测疟原虫感染的方法

说明书

本发明涉及一种用于检测患者血液样本中疟原虫感染的方法，其中对样本中的多形核嗜中性粒细胞进行示差分析，并且测定细胞体积和细胞密度的分布、样本中的血小板数量以及样本中血小板细胞密度的分布。

本申请是基于申请日为2011年12月20日、申请号为201180068461.7、 发明名称为“检测疟原虫感染的方法”的中国专利申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及一种用于检测患者血液样本中疟原虫感染的方法。

背景技术

疟原虫感染，例如，由病原体恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、间 日疟原虫(Plasmodium vivax)、卵形疟原虫(Plasmodium ovale)、三日疟原虫 (Plasmodiummalariae)以及诺氏疟原虫(plasmodium knowlesi)引起的疟疾，是 导致全球每年数百万新发病例的元凶。根据世界卫生组织(WHO)的数据显示, 每年计算的新发病例的范围为3至5亿人。

鉴于对现有治疗疟原虫感染的药物的抗药性的不断发展，因此越来越需 要可靠的、价格实惠并迅速可行的诊断方法，此外，该方法能基本上排除假 阳性和假阴性的结果。例如，在疟疾感染发病率较低的区域将需要高度敏感 的诊断方法来检测这样的少数患者。

然而，在有高患病率/发病率的世界各地区，通常也视为世界的贫困地区， 非常需要具有高特异性的测试方法，以排除假阳性的结果。(即，要把健康 的人作为健康来识别)。

一般情况下，也存在问题，不仅要分析数量非常大的患者样本，而且， -如上所述-也必须迅速地执行。因为诊断结果应在不到2小时之内是可用的。 如果无法做到这一点，可能需要依据表面性的临床评估来治疗患者。

错误的或假阴性/阳性的疟疾诊断的后果是多方面的：对于假阳性的诊 断，(无意义的)药物的使用会带来可避免的副作用，就更不用说对卫生系统 造成的财政负担，以及由疟原虫形成抗药性的可能性。从2006年的一项研 究得出结论，各具95％的敏感度和特异性的诊断测试，仅要求最低限度的基 础设施，就可以避免超过10万人死亡以及节省超过4亿的不必要的治疗。 (Rafael ME,Taylor T,Magill A et al.Reducing the burden ofchildhood malaria in Africa:The role of improved diagnosis.Nature.2006；444(suppl 1):39-48)

实际上，一个主要问题出现在寄生虫病如疟疾的诊断，其中，只有当临 床怀疑患者实际上患有这种感染，才进行实验室诊断。这会导致特别是在低 患病率/发病率的地区，患病的人不能或不能及时得到治疗。例如，据加拿大 的一项研究报道(Kain et al,1998,Clinics in Infectious Diseases 27,142-149)， 对于59％的感染疟疾的返港旅客最初不能做出正确的诊断。平均在做出正确 诊断以及开始治疗恶性疟原虫之前要经过7.6天，对于间日疟原虫要5.1天。 这种延误可导致显著的并发症以及死亡率的提高。(Humare etal,1997, Canadian Medical Association Journal 156,1165-1167)

对于疟原虫感染的诊断，有多种方法可用：最安全的方法是显微血液检 查，但是这种方法耗废人力、时间和设备。受过专门训练的人员用通常的显 微方法可以可靠地确定感染的类型和阶段。

此外，还存在所谓的快速诊断测试(Rapid Diagnostic Tests＝RDT)。例如， 这里会使用单克隆抗体来检测寄生虫抗原。该测试通常用于识别恶性疟原虫 感染。

一种诊断疟疾的明显更敏感的方法是聚合酶链反应，然而由于高耗材和 耗时对于急性病例不是很合适。