[发明专利]D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体的分离检测方法

权利要求书

1.一种D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体的分离检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、使用衍生化试剂和D-对羟基苯甘氨酸在室温及反应溶剂中进行衍生化反应，制备得到衍生化产品；所述的步骤一中的衍生化反应按照以下方法进行：将D-对羟基苯甘氨酸、衍生化试剂、碱以及反应溶剂混合，在室温下搅拌反应；反应结束后，经后处理得到D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体衍生化产品；

所述的衍生化试剂和D-对羟基苯甘氨酸的摩尔比为n:1，其中1＜n≤10；

所述反应溶剂选自下列溶剂中的一种或多种：四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、1,4-二氧六环、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、水、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳；

所述反应温度从0℃到所使用反应溶剂的常压沸点温度；

所述的碱选自下列中的一种或多种：二乙胺、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、乙二胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾；

步骤二、将所述衍生化产品使用正相高效液相色谱法进行分析，分离和检测衍生化的D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体；

所述的衍生化试剂选自二碳酸二叔丁酯、9-氯甲酸笏甲酯、氯甲酸苄酯中的一种；

所述高效液相色谱法的液相色谱条件为：Daicel ChiralPak IA 250 mm×4.6 mm, 5μm色谱柱，流动相为正己烷-乙醇-三氟乙酸体积比为90:10:0.1，紫外检测波长245 nm, 流速0.8 mL/min, 柱温25℃，进样体积5μL。

2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 1＜n≤2。

3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于， 1.1≤n≤1.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的衍生化试剂为二碳酸二叔丁酯。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应溶剂为1,4-二氧六环和水的混合物。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应溶剂与D-对羟基苯甘氨酸的体积比为1~100:1。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述体积比为3~50:1。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述体积比为5~10:1。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碱为三乙胺。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的衍生化反应按照以下方法进行：

（1）在反应器中加入D-对羟基苯甘氨酸，溶解于所述反应溶剂中，缓慢加入所述衍生化试剂和所述碱，在室温下搅拌反应；

（2）TLC跟踪至反应结束后，加入稀盐酸调节反应液pH至7，再加入乙酸乙酯萃取，减压浓缩除去乙酸乙酯，即得到D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体衍生化产品。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的高效液相色谱法按照以下方法进行：

(1) 取D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体衍生化产品，用乙醇溶解，配制成每1 mL 含D-对羟基苯甘氨酸及其对映异构体10-30 mg 的样品溶液；

(2) 设置流动相流速为0.8 mL/min，检测波长为245 nm，色谱柱柱温25℃；

(3) 取步骤(1) 的样品溶液5 μL注入色谱仪，记录色谱图。