[发明专利]一种PCV2 Cap标记蛋白的重组昆虫杆状病毒表达载体的构建方法

权利要求书

1.一种猪圆环病毒二型Cap标记蛋白的重组昆虫杆状病毒表达载体的构建方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)将PCV2GZ-RH1株全基因克隆至pMD19-T载体，设计引物以重组T载体为模板通过PCR技术将V5Tag或FlagTag标签引入至PCV2的ORF2末端；(2)将携带标签的ORF2亚克隆至pFastBacHTA、pFastBacDual供体质粒，将亚克隆所得的阳性质粒转化入DH10Bac感受态细胞进行Bacmind杆粒的制备；(3)将Bacmind杆粒转染昆虫细胞，获得重组昆虫杆状病毒，重组昆虫杆状病毒扩增至P3代病毒。

2.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒二型Cap标记蛋白的重组昆虫杆状病毒表达载体的构建方法，其特征在于：所述的引物为引物对F2/R2；F2、R2的基因序列如Seq IDNO.4、Seq ID NO.5所示；

Seq ID NO.4：5′-GGATCCACTCAGTAATTTATTTCATATGGA-3′；

Seq ID NO.5：5′-AAGCTTCTTTTTATCACTTCGTAATGGTTTTTATTATTCATTACGTAGAATCGAGACCGAGGAGAGGGTTAGGGATAGGCTTACCAGGGTTAAGTGGGGGGTCTTT-3′。

3.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒二型Cap标记蛋白的重组昆虫杆状病毒表达载体的构建方法，其特征在于：所述的引物为引物对F3/R3，F3、R3的基因序列如Seq IDNO.6和Seq ID NO.7所示：Seq ID NO.6：5′-GGATCCACTCAGTAATTTATTTCATATGGA-3′；

Seq ID NO.7：5′-AAGCTTACCTTTTTATCACTTCGTAATGGTTTTTATTATTCATTAGATTACAAGGATGACGACGATAAGAGGGTTAAGTGGGGGGTCTTT-3′。