[发明专利]指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法

权利要求书

1.一种指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法，包括以下步骤：

（1）制备混合对照品溶液；

（2）制备供试品溶液：分别制备广陈皮供试品溶液、陈皮供试品溶液；

（3）分别对广陈皮供试品溶液、陈皮供试品溶液进行HPLC指纹图谱检测，将所得HPLC指纹图谱与混合对照品溶液的HPLC指纹图谱进行比较分析，用相似度、聚类分析和/或主成分分析模型区分广陈皮与陈皮；

HPLC法制作指纹图谱的条件是：色谱柱：采用十八烷基键合硅胶柱；流动相：乙腈-水，梯度洗脱；洗脱程序为：0-10 min，5 %-10 %乙腈；10-50 min，10%-30%乙腈；50-65 min，30%-45%乙腈；65-85 min，45 %-90 %乙腈；85-87 min，90%-5%乙腈，保持5 min；流速0.8~1.2 mL/min；柱温25~35℃，进样量15~25μL，检测波长250~290nm；

所述聚类分析为采用IBM SPSS Statistics 20软件，将量化指纹特征作为变量进行系统聚类分析，以欧式距离平方为变量距离测定方法，采用最小方差法进行分析；

所述主成分分析为采用SIMCA-P v11.5软件，对广陈皮与陈皮样品进行主成分分析。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，制备混合对照品溶液的方法是：称取橙皮苷、川陈皮素和桔皮素对照品，用甲醇溶解配制成储备液，吸取各对照品储备液，加甲醇稀释摇匀，配制成混合对照品溶液。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，混合对照品溶液中，橙皮苷浓度为0.120 mg/mL、川陈皮素浓度为0.017 mg/mL、桔皮素浓度为0.015 mg/mL。

4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，HPLC法制作指纹图谱的条件是，过柱流速1.0mL/min；柱温30℃，进样量20μL，检测波长270nm。

5.根据权利要求1或3所述的分析方法，其特征在于，混合对照品溶液的HPLC指纹图谱的主要特征峰为：与橙皮苷对应的9号峰、与川陈皮素对应的13号峰、与桔皮素对应的16号峰，其保留时间分别为35.87、65.06、69.71 min；以9号峰橙皮苷为参照峰。

6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，特征峰还包括：保留时间为17.88 min的1号峰、保留时间为19.04 min的2号峰、保留时间为20.02 min的3号峰、保留时间为26.88min的4号峰、保留时间为28.66 min的5号峰、保留时间为29.56 min的6号峰、保留时间为32.70 min的7号峰、保留时间为33.64 min的8号峰、保留时间为57.15 min的10号峰、保留时间为60.97 min的11号峰、保留时间为62.17 min的12号峰、保留时间为65.96 min的14号峰、保留时间为67.58 min的15号峰、保留时间为72.18 min的17号峰。

7.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，分析区分广陈皮与陈皮的方法是：将得到广陈皮与陈皮样品的HPLC数据导入指纹图谱相似度计算软件，对得到相似度进行分析，以数据大小范围形式对区分结果进行展示，当相似度小于0.4时为陈皮，当相似度大于0.9时为广陈皮。