[发明专利]指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法

说明书

本发明公开了HPLC指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法。包括：将广陈皮样品与陈皮样品分别进行前处理，通过高效液相色谱仪进行梯度洗脱获得广陈皮共有模式的指纹图谱，分析其指纹图谱信息得到以橙皮苷为参照峰的17个共有峰，并通过与标准品比对，鉴定了3个共有峰。然后对不同批次的广陈皮样品与陈皮样品的HPLC原始数据进行预处理后，进行相似度计算、聚类分析和主成分分析。本发明的分析结果以相似度数据范围、树状聚类分析图及PCA得分图的形式展示，构建的广陈皮质控模式清晰地揭示了广陈皮与陈皮规律性和差异性，能够直观判别其品种情况，无需再进行相关验证和分析，体现出品种之间的量化差异，可作为区分广陈皮与陈皮的分析方法。

技术领域

本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法。

背景技术

广陈皮是由茶枝柑的成熟果实的果皮晒干或低温干燥而成的，是陈皮的道地药材。广陈皮具有很高的药用价值，有“陈久者良”之说。从这个角度考虑，有效鉴别区分陈皮品种对于质量控制具有一定意义。药典通过性状鉴别区分广陈皮与普通陈皮，以橙皮苷含量作为质量控制的指标。虽然常规性状显微鉴别可以达到一定的效果，但是这种手段比较原始，不利于大规模检测，且检测误差也比较大。

另一方面，目前对陈皮的质量评价主要是着重于检测其中一个或几个化合物量为指标判定药材质量的结论过于局限，无法全面地评价药材质量。因此，找到一种既可以很简便地区分陈皮和广陈皮又可以客观全面量化地评价药材质量的方法具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于公开一种指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法。

本发明所采取的技术方案是：一种指纹图谱结合化学计量学区分广陈皮与陈皮的分析方法，包括以下步骤：

(1)制备混合对照品溶液；

(2)制备供试品溶液；

(3)应用HPLC法构建指纹图谱方法实现对前处理后的样品中的化学成分的分离与测定，然后对得到广陈皮样品与陈皮样品的HPLC指纹图谱数据进行预处理，最后应用相似度、聚类分析和主成分分析模型区分广陈皮与陈皮。

优选的，制备混合对照品溶液的方法是：称取橙皮苷、川陈皮素和桔皮素对照品，用甲醇溶解配制成储备液，吸取各对照品储备液，加甲醇稀释摇匀，配制成混合对照品溶液。

优选的，制备的混合对照品溶液中橙皮苷浓度为0.120mg/mL、川陈皮素浓度为0.017mg/mL、桔皮素浓度为0.015mg/mL。

优选的，HPLC法制作指纹图谱的条件是：色谱柱：采用十八烷基键合硅胶柱；流动相：乙腈-水，梯度洗脱；洗脱程序为：0-10min，5％-10％乙腈；10-50min，10％-30％乙腈；50-65min，30％-45％乙腈；65-85min，45％-90％乙腈；85-87min，90％-5％乙腈，保持5min；流速0.8～1.2mL/min；柱温25～35℃，进样量15～25μL，检测波长250～290nm。

进一步优选的，流速1.0mL/min；柱温30℃，进样量20μL，检测波长270nm。

优选的，主要特征峰为：与橙皮苷对应的9号峰、与川陈皮素对应的13号峰、与桔皮素对应的16号峰，其保留时间分别为35.87、65.06、69.71min；以9号峰橙皮苷为参照峰。