[发明专利]一种基于蛋白质定量检测的食品农产品真实性检测方法及实现该方法的试剂盒有效
申请号: | 201711106877.9 | 申请日: | 2017-11-10 |
公开(公告)号: | CN108152449B | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
发明(设计)人: | 房芳;郝星凯;孙姗姗;应美蓉;吴亚君;陈启 | 申请(专利权)人: | 杭州谱胜检测科技有限责任公司 |
主分类号: | G01N33/00 | 分类号: | G01N33/00;G01N33/02;G01N33/04;G01N33/12;G01N30/02 |
代理公司: | 杭州知见专利代理有限公司 33295 | 代理人: | 赵越剑 |
地址: | 310003 浙江省杭州市下城*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 蛋白质 定量 检测 食品 农产品 真实性 方法 实现 试剂盒 | ||
1.一种基于蛋白质定量检测的食品农产品真实性检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)检测待检品的总蛋白含量P;
(2)检测待检品中一种或多种内源性蛋白质的含量Pi;
(3)根据步骤(1)和步骤(2)的检测结果计算待检品中所有被测内源性蛋白质的含量总和占总蛋白质含量的比例η:
,其中,i表示被检测的内源性蛋白质的种类,n≥1;
(4)分别将P与总蛋白标准含量P’、η与所有被测内源性蛋白质的含量总和占总蛋白质标准含量的标准比例η’进行比较,根据比较结果判断待检品真实性;
所述P’是指总蛋白标准含量,η’是指所有被测内源性蛋白质的含量总和占总蛋白质标准含量的标准比例η’;
所述食品农产品为乳与乳制品,步骤(2)中,所述内源性蛋白质为αs1酪蛋白、αs2酪蛋白、β酪蛋白、κ酪蛋白、α乳白蛋白和β乳球蛋白中的至少一种;步骤(2)中,采用同位素稀释液相色谱串联质谱法对各内源性蛋白质的含量进行检测;检测前,采用碱性胰蛋白酶对待检品进行酶解;
所述步骤(4)中,设置了两个阈值,其中总蛋白质含量的最低阈值为2.8g/100g,而六种内源性蛋白质占总蛋白的比例的最低阈值为82%;
当总蛋白质含量低于相应阈值时,可以判定该待检品中掺入了不含氮的物质;当总蛋白质含量高于相应阈值,而六种主要内源性蛋白质之和占总蛋白百分比低于相应阈值时,可以判定该待检品中掺入了含氮的物质;当两个检测值均高于相应阈值时,则判定该待检品无掺假情况;
步骤(1)中,采用凯氏定氮法分别对待检品和标准品的总蛋白质含量进行检测;
各内源性蛋白质所对应的特异肽分别是:
αs1酪蛋白:YLGYLEQLLR;
αs2酪蛋白:ALNEINQFYQK;
β酪蛋白:VLPVPQK;
κ酪蛋白:YIPIQYVLSR;
α乳白蛋白:VGINYWLAHK;
β乳球蛋白:IDALNENK。
2.如权利要求1所述的基于蛋白质定量检测的食品农产品真实性检测方法,其特征在于,步骤(4)中,采用与步骤(1)~(3)相同的方法对标准品进行检测,分别获得总蛋白标准含量P’,以及标准品中所有被测内源性蛋白质的含量总和占总蛋白质含量的标准比例η’。
3.一种用于实现如权利要求1~2任意一项所述基于蛋白质定量检测的食品农产品真实性检测方法的试剂盒。
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