[发明专利]一种制备利拉鲁肽的方法

权利要求书

1.一种利拉鲁肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、通过Fmoc-Glu-OAll与树脂Resin反应合成Fmoc-Glu(Resin)-OAll氨基酸树脂I；其中，所述反应是在活化剂存在下进行偶联反应，所述的树脂Resin为固相载体树脂，固相载体树脂为羟基类型树脂，羟基类型树脂为Wang树脂或对羟甲基苯氧甲基聚苯乙烯HMP树脂；

步骤2、通过Trityl-Cl类型树脂合成Fmoc-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-OH片段II，经过碳端叔丁酯化、去Fmoc后得到H-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-OtBu片段IV；

步骤3、Fmoc-Glu(Resin)-OAll氨基酸树脂I在去保护液作用下脱去保护基Fmoc后，在活化剂系统存在下与Fmoc-Lys(P_g1)-OH偶联得Fmoc-Lys(P_g1)-Glu(Resin)-OAll肽树脂Ⅱ；其中，P_g1为Dde或iVDde；

步骤4、Fmoc-Lys(P_g1)-Glu(Resin)-OAll肽树脂Ⅱ脱除Fomc后，在活化剂系统存在下与Fmoc-Ala-OH偶联得Fmoc-Ala-Lys(P_g1)-Glu(Resin)-OAll，继续重复脱Fmoc和偶联操作，依次偶联Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Boc-His(P_g2)OH得Boc-His(P_g2)-Ala-Glu(tBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(tBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(tBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(P_g1)-Glu(Resin)-OAll肽树脂Ⅲ；其中，P_g2为Trt或Boc；

步骤5、肽树脂Ⅲ在碱性条件下脱除保护基P_g1后，在活化剂系统存在下与Fmoc-Glu-OtBu偶联后；所得肽树脂脱除保护基Fmoc后，在活化剂系统存在下与Pal-OH偶联得

Boc-His(P_g2)-Ala-Glu(tBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(tBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(tBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(N^α-Pal-γ-Glu-OtBu)-Glu(Resin)-OAll肽树脂Ⅳ；

步骤6、肽树脂Ⅳ在钯催化体系下脱除保护基All后，在活化剂系统存在下与片段IV偶联得

Boc-His(P_g2)-Ala-Glu(tBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(tBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(tBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(N^α-Pal-γ-Glu-OtBu)-Glu(Resin)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-OtBu利拉鲁肽肽树脂；

步骤7、在20℃以下，将利拉鲁肽肽树脂加入到十倍量的三氟乙酸体系的裂解液中，控制温度20-30℃搅拌反应1-3小时；将所得反应体系过滤，滤液经减压浓缩后，再缓慢加入到0℃以下的醚类溶剂中，边搅拌边滴加；所得白色沉淀物经离心分离和多次洗涤再离心分离，减压干燥后即得利拉鲁肽粗品。