[发明专利]富集循环稀有细胞的试剂及方法

权利要求书

1.一种从血液样品中富集循环稀有细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：

从血液样品中分离去除红细胞；

应用携带可识别信号的抗体标记血液样品中的白细胞，应用荧光染料标记有核细胞；

通过可鉴别可识别信号以及荧光染料的装置检测细胞，并分离出无白细胞标记的有核细胞，最终获得富集的循环稀有细胞；所述的可鉴别可识别信号以及荧光染料的装置是微流体检测装置；

所述的抗体是抗体组合为：抗CD45抗体、抗CD14抗体、抗CD55抗体、抗CD66b抗体、抗CD90抗体、抗CD33抗体和抗CD36抗体。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的微流体检测装置包括：

微流体结构(7)，其包括单细胞通道(11)，允许单细胞以稳定的流速通过，并存在多条单细胞通道以允许单细胞的分流；

荧光检测组件(5)，根据不同的荧光信号对每个细胞进行甄别，快速确认其身份，判断是否在下一步对其进行分选；

微射流发生器(6)，其包括微型金属导体，接受荧光检测组件(5)的分选信号、引发微热泡。

3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的可识别信号包括：FITC、PE、APC、Rhodamine B或Alexa 555。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的可识别信号为FITC。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的荧光染料包括：DAPI或hoechst。

6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的荧光染料为DAPI。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的分离去除红细胞的方法是裂解液裂解或密度梯度离心；或

通过应用携带可识别信号的抗体处理血液样本，从中分离去除红细胞。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，应用于分离去除红细胞的可识别信号不同于应用于去除白细胞的可识别信号。

9.抗体的用途，用于从血液样品中富集循环稀有细胞时，从样品中分离去除白细胞；所述的抗体是抗体组合，包括：抗CD45抗体、抗CD14抗体、抗CD55抗体、抗CD66b抗体、抗CD90抗体、抗CD33抗体和抗CD36抗体。

10. 一种用于从血液样品中富集循环稀有细胞的试剂盒，其特征在于，其中包括微流体检测装置，其包括：微流体结构(7)，其包括单细胞通道(11)，允许单细胞以稳定的流速通过，并存在多条单细胞通道以允许单细胞的分流；荧光检测组件(5)，根据不同的荧光信号对每个细胞进行甄别，快速确认其身份，判断是否在下一步对其进行分选；微射流发生器(6)，其包括微型金属导体，接受荧光检测组件(5)的分选信号、引发微热泡；

携带可识别信号的抗体；所述的抗体是抗体组合，包括：抗CD45抗体、抗CD14抗体、抗CD55抗体、抗CD66b抗体、抗CD90抗体、抗CD33抗体和抗CD36抗体；以及

标记有核细胞的荧光染料。

11.如权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述的微流体检测装置中，包括：

基片(8)；

位于基片上的微射流发生器(6)；

位于微射流发生器(6)上的微流体结构(7)；

位于微流体结构(7)上的盖片(10)。

12.如权利要求11所述的试剂盒，其特征在于，微射流发生器(6)存在于一保护层(9)中，该保护层在基片(8)与微流体结构(7)之间。